发明名称 |
转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列及其应用 |
摘要 |
本发明公开了一种转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列及其应用,涉及生物工程技术领域中转基因油菜的检测。本发明以转基因油菜品种Topas 19/2为材料,利用Invitrogen公司GenomeWalker试剂盒构建基因组文库,并利用引物:TOPLB-1:5’TCGCCCAATAGCAGCCAGTCCCTTCC 3’和TOPLB-2:5’AGTCCCTTCCCGCTTCAGTGACAACG 3’与试剂盒提供的接头引物进行PCR扩增,获得Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列,序列为SEQ NO.1。其中第1-550位碱基与插入载体序列相同,第551-823位碱基与插入载体无同源性,为油菜基因组序列。根据插入载体序列和油菜基因组序列的接合序列,设计了引物TOPLG:5’CGGCCTTAATCCCACCCCAG 3’和TOPLV:5’AGTTCCAAACGTAAAACGGCTT 3’以及TaqMan探针TOPLP:5’FAM-TCCCGGTCATATATCAGCGCCGGTC-TAMRA 3’,建立了转基因油菜外源基因整合事件Topas 19/2的事件特异性定性、定量检测方法。本发明可以进一步用于建立转基因油菜Topas 19/2的其他事件特异性PCR检测方法研究。 |
申请公布号 |
CN101020907A |
申请公布日期 |
2007.08.22 |
申请号 |
CN200710051357.2 |
申请日期 |
2007.01.24 |
申请人 |
中国农业科学院油料作物研究所 |
发明人 |
卢长明;吴刚;武玉花;肖玲 |
分类号 |
C12N15/82(2006.01);C12N15/29(2006.01);C12N15/65(2006.01);C12Q1/68(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/82(2006.01) |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 |
代理人 |
黄瑞棠 |
主权项 |
1、一种转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列,其特征是:(1)第1至550个碱基来源于外源插入载体序列,SEQ NO.1;(2)第551至823个碱基来源于油菜基因组序列,SEQ NO.1;(3)由来源于外源插入载体的第1至550个碱基和来源于油菜基因组序列的第551至823个碱基共同组成的DNA序列,转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列; |
地址 |
430062湖北省武汉市武昌区徐东二路2号 |