三价金属介导的均相发光邻近试验

摘要

一种体外蛋白激酶试验技术，它的特征为：(1)试验信噪比(S/B)和范围(S－B)高；(2)均相；(3)非放射性；和(4)不需要磷酸化特异性抗体。所述试验包括(例如)通过合适键合基将三价金属离子(如Ga³⁺、Fe³⁺、Al³⁺、In³⁺、Ru³⁺、Sc³⁺、Y³⁺)络合于放大发光邻近试验受体或供体珠的表面，合适键合基有(例如)三乙酸腈(NTA；也称为羧甲基－赖氨酸)、亚氨基二乙酸(IDA)或合适取代的含N杂环，如叠氮杂环，如叠氮环壬烷并壬烷，如1－丙基氨基－4－乙酸基(acetato)－1，4，7－三氮杂环壬烷。将蛋白质(或组成部分)或其它激酶底物结合于放大发光邻近试验受体或供体珠中另一种的表面上，如果磷酸化，则与络合有三价金属离子的受体珠接近，产生发光信号。激酶抑制剂的存在能抑制磷酸化，从而可以此方式检测到信号产生。由于如本文所述的本发明能鉴定蛋白质(或组成部分)或其它生物大分子(如单核苷酸、二核苷酸或三核苷酸，环状核苷酸或磷酸取代的肌醇)上是否存在磷酸基团，可将其广泛应用于任何磷酸化或去磷酸化反应酶，提供用于蛋白激酶和其它酶类型，包括脂质激酶、磷酸酶、磷酸二酯酶等的非常强效和灵活的试验形式。

主权项

1.一种组合物，其包含：含光敏剂的供体颗粒；含有化学发光化合物的受体颗粒，所述化合物的特征是在光敏剂被活化且供体和受体颗粒接近时它产生发光信号；和络合于供体或受体颗粒之一的表面的三价金属离子。