改进的类胡萝卜素发酵生产

摘要

本发明涉及与类胡萝卜素生产相关的DNA序列；含有这类DNA序列的载体；用这类DNA序列或者载体转化的原核或者真核的宿主细胞；以及在适宜的条件下培养这类细胞以制备类胡萝卜素或从这类细胞或者培养物中分离单一类胡萝卜素并应用于食品和饲料工业的方法。

主权项

1.制备阿东黄质和虾青素的混合物或单独的阿东黄质或虾青素的方法，所述方法包括在适宜充分表达可催化焦磷酸法呢基酯和焦磷酸异戊烯酯转化成阿东黄质和虾青素的培养条件下，培养含有焦磷酸法呢基酯和焦磷酸异戊烯酯的重组宿主细胞，其中所述重组宿主细胞用包含调节序列以及含有以下编码酶的DNA序列的多核苷酸的表达载体转化：a)DNA序列，其编码黄杆菌R1534的焦磷酸香草基香草基酯合成酶(crtE)(SEQ ID NO：2)，或者编码与黄杆菌R1534 crtE的氨基酸序列有超过90％的相同氨基酸、且显示与黄杆菌R1534 crtE编码的酶有相同酶活性的氨基酸序列；b)DNA序列，其编码黄杆菌R1534的前八氢番茄红素合成酶(crtB)(SEQID NO：3)，或者编码与黄杆菌R1534 crtB的氨基酸序列有超过90％的相同氨基酸、且显示与黄杆菌R1534 crtB编码的酶有相同类型酶活性的氨基酸序列；c)DNA序列，其编码黄杆菌R1534的八氢番茄红素脱氢酶(crtI)(SEQ IDNO：4)，或者编码与黄杆菌R1534 crtI的氨基酸序列有超过90％的相同氨基酸、且显示与黄杆菌R1534 crtI编码的酶有相同类型酶活性的氨基酸序列；d)DNA序列，其编码黄杆菌R1534的番茄红素环化酶(crtY)(SEQ IDNO：5)，或者编码与黄杆菌R1534 crtY的氨基酸序列有超过90％的相同氨基酸、且显示与黄杆菌R1534 crtY编码的酶有相同类型酶活性的氨基酸序列；e)DNA序列，其编码微生物E-396(FERM BP-4283)的β-胡萝卜素羟化酶[crtZE396](SEQ ID NO：34)，或编码与微生物E-396(FERM BP-4283)crtZE396的氨基酸序列有超过95％的相同氨基酸、且显示与微生物E-396(FERMBP-4283)crtZE396编码的酶有相同类型酶活性的氨基酸序列；f)DNA序列，其编码产碱杆菌PC-1株的β-胡萝卜素β4-加氧酶(crtW)(SEQ ID NO：29)，或编码与产碱杆菌PC-1株crtW的氨基酸序列有超过90％的相同氨基酸、且显示与产碱杆菌PC-1株crtW编码的酶有相同类型酶活性的氨基酸序列；以及从这类细胞的培养基中分离阿东黄质和虾青素混合物或单独的阿东黄质或虾青素。