发明名称 |
一种深海适冷微生物胞外多糖的制备方法 |
摘要 |
一种新的深海适冷微生物胞外多糖的制备方法,属于海洋生物技术领域。本发明提供以胞外多糖产率高的深海适冷菌Pseudomonas sp.SM9913为菌株通过液体深层发酵制备胞外多糖的工艺,得到分离纯化的胞外多糖,解析其结构,乙酰基的引入使分子的伸展变化,导致多糖羟基基团的暴露,增加其在水中的溶解性,从而提高其生物活性。本发明的所制备的多糖纯品可广泛用于药物、生物技术领域、食品、环保、化妆品等领域。 |
申请公布号 |
CN1986825A |
申请公布日期 |
2007.06.27 |
申请号 |
CN200610070795.9 |
申请日期 |
2006.12.19 |
申请人 |
山东大学 |
发明人 |
张玉忠;秦国奎;陈秀兰;周维芝;何海伦;石梅;张熙颖 |
分类号 |
C12P19/04(2006.01);C12N1/20(2006.01);C08B37/00(2006.01) |
主分类号 |
C12P19/04(2006.01) |
代理机构 |
济南金迪知识产权代理有限公司 |
代理人 |
许德山 |
主权项 |
1、一种深海适冷微生物胞外多糖的制备方法,包括如下步骤:(1)种子制备培养基:豆饼粉2~3份、玉米2~3份、麸皮1~1.5份、Na2HPO4 0.4~0.5份、KH2PO4 0.03~0.04份和水100份,均为重量份,培养基100-120℃灭菌30-50分钟,冷却后,以深海适冷菌Pseudomonas sp.SM9913为菌株,接茄子瓶菌种的菌悬液,接种量5-7%质量百分比;通风,搅拌,培养;得种子液,待用;(2)液体深层发酵制备胞外多糖发酵液培养基,:豆饼粉3~3.5份、玉米粉2.5~3份、山芋粉2.5~3份、麸皮2.0~2.5份、Na2HPO4 0.4~0.5份、KH2PO4 0.03~0.04份和水100份,均为重量份;1000升发酵罐,装450升培养基,灭菌后pH6.2~6.3,接种步骤(1)制备的种子5~7%,搅拌200~220转/分,控制通风量0-12小时1∶0.5~0.6,12-20小时1∶0.6~0.7,20-28小时1∶0.8~0.9,控制培养温度10~12℃,发酵48~72小时;(3)胞外多糖发酵液的后处理上述胞外多糖发酵液经10000rpm离心,然后离心上清液用无水乙醇沉淀,上清液体积与无水乙醇体积比例为1∶3,除蛋白、脱色后,离心干燥得到多糖粗制品。多糖粗品在60~70℃热水中重溶,浓缩至原体积的20~30%,再经过凝胶过滤层析和离子交换层析技术分离,真空冷冻干燥,得到多糖的纯品。 |
地址 |
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