脂联素－胰升糖素样肽－1类似肽融合蛋白表达载体及构建

摘要

本发明公开了人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建方法。本发明运用PCR技术获得人脂联素和GLP-1-A编码基因，脂联素基因通过扩增脂联素球状域基因获得，通过将人GLP-1(7-37)编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子突变为甘氨酸密码子获得GLP-1-A编码基因，运用酶切技术，将GLP-1-A和脂联素编码基因定向克隆到表达载体，获得人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体，经转化蛋白表达细菌表达出了含肠激酶识别序列的人Adiponectin-GLP-1-A融合蛋白，本发明为进一步研究其活性，测定融合蛋白上GLP-1-A半衰期，得到能促进胰岛β细胞分泌胰岛素、能改善胰岛素抵抗、副作用小的新蛋白提供良好的前期研究。

主权项

权利要求书1.人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的cDNA序列，其特征是：全长共567个bp，1-15bp编码肠激酶识别序列，16-108bp编码人胰升糖素样肽-1类似肽(Glucagons-like Peptide-1Analogues，GLP-1-A)，序列长93bp，其中19-21bp将人胰升糖素样肽-1(7-37)[Glucagons-like Peptide-1(7-37)，GLP-1(7-37)]编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子GCT突变为甘氨酸密码子GGT，109-153bp编码接头肽DNA序列，序列长45bp，154-564bp编码脂联素，序列长411bp，565-567bp为终止密码子，该融合基因cDNA序列见SEQ ID NO 1。