美洲大蠊成虫提取物的制备方法

摘要

本发明涉及美洲大蠊成虫提取物的制备方法：将乙醇提取与水提取工艺相结合，总回收率达25.2％，比单纯的醇提取法得率高出一倍多，回收产品氨基酸含量高达58.5％。所述的制备方法步骤简单、所用溶剂价廉易得、提取时间短且提取完全。小鼠急性毒性试验表明本发明制得的提取物安全无毒副作用。

主权项

1、美洲大蠊成虫提取物的一种制备方法，其特征在于按以下工艺步骤进行：A水提取：(1)粗提：选取一月内美洲大蠊成虫，转移至供水但撤食的玻璃缸内饲养5-6天，待成虫吐尽内容物后-20℃冷冻30min处死，75％乙醇快速清洗虫体表面，蒸馏水淋洗两遍，凉干，剪去翅、足、触须后称取10g放入研钵中，加入10ml蒸馏水研磨30min后置-20℃冰箱中冷冻15min，如此反复3次，直到虫体被充分磨成匀浆。将匀浆移入50ml离心管中，定容至40ml，4000rpm离心15min，分离上层油状物和下层沉淀，取中间上清液，10000rpm离心15min，分离上层油状物和下层沉淀，取中间上清液，-4℃冰箱静置过夜。(2)浓缩、醇洗：在沸水浴中加热至沸腾蒸发，待上清液浓缩至原有体积1/4时生成大量棕灰色沉淀，冷却后10000rpm离心15min，弃去上层油状物和下层沉淀，取中间上清液。加热至60℃左右，趁热加入95％乙醇(2∶1)，不断搅拌，冷却至室温后，10000rpm离心15min除去上清液，得白色沉淀物，乙醇反复沉淀三次。(3)精制：取白色沉淀物加热溶解，加入1/10-1/8体积活性碳后不断搅拌，80℃加热30min，趁热过滤，用少量蒸馏水洗活性碳二次，合并每次洗滤液，95％乙醇重结晶。B：醇提取：取水提取第一步分离得到的上层油状物和下层沉淀，加入2倍体积的85％乙醇，热回流抽提1-2小时，醇提取的全过程温度控制在75℃左右，将提取物在沸水浴中加热浓缩至原有体积1/4，冷却后10000rpm离心15min，弃去上层油状物和下层沉淀，加入活性炭吸附精制。将水提取物与醇提取物等体积混合即得本发明的美洲大蠊成虫提取物。