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LA INVENCION SE REFIERE A UN PROCEDIMIENTO MEJORADO QUE PERMITE LA DETECCION ESTANDARIZADA, RAPIDA Y SENSIBLE, DE UN ACIDO NUCLEICO DIANA DE UN MICROORGANISMO PATOGENO O VIRUS, O DE UN GEN NORMAL O ANORMAL, EN UNA MUESTRA. DICHO PROCEDIMIENTO CONSISTE EN HIBRIDAR UN ACIDO NUCLEICO DIANA CON VARIAS SONDAS OLIGONUCLEOTIDICAS NO SOLAPANTES, QUE HIBRIDAN CON REGIONES ADYACENTES EN EL ACIDO NUCLEICO DIANA, LAS CUALES SE DENOMINAN SONDAS DE CAPTURA/AMPLIFICACION Y SONDAS DE AMPLIFICACION, RESPECTIVAMENTE, EN PRESENCIA DE GRANULOS PARAMAGNETICOS REVESTIDOS CON UNA FRACCION QUE SE UNE A LIGANDO. MEDIANTE LA UNION DE UN LIGANDO UNIDO A UN EXTREMO DE LA SONDA DE CAPTURA/AMPLIFICACION Y LA HIBRIDACION ESPECIFICA DE PARTES DE LAS SONDAS A SECUENCIAS ADYACENTES EN EL ACIDO NUCLEICO DIANA, SE FORMA UN COMPLEJO QUE COMPRENDE EL ACIDO NUCLEICO DIANA, LAS SONDAS Y LOS GRANULOS PARAMAGNETICOS. DICHAS SONDAS SE PUEDEN UNIR A CONTINUACION ENTRE SI, FORMANDO UN COMPLEJO CONSTITUIDO POR LA SECUENCIA DE AMPLIFICACION UNIDA CONTINUA UNIDA A LOS GRANULOS, COMPLEJO QUE SE PUEDE DESNATURALIZAR PARA ELIMINAR EL ACIDO NUCLEICO Y LAS SONDAS NO UNIDAS. ALTERNATIVAMENTE, SE PUEDEN EMPLEAR SONDAS DE AMPLIFICACION Y CAPTURA SEPARADAS, LAS CUALES FORMAN SONDAS CIRCULARES O SONDAS CONTINUAS DE LARGA LONGITUD, Y SE PUEDEN DETECTAR O AMPLIFICAR DIRECTAMENTE, UTILIZANDO UNA TECNICA DE AMPLIFICACION ADECUADA, P.EJ.: PCR, RAM O HSAM, PARA LA DETECCION. LA DETECCION DE LA SECUENCIA DE AMPLIFICACION UNIDA, BIEN DIRECTAMENTE O TRAS LA AMPLIFICACION DE LA MISMA, INDICA LA PRESENCIA DEL ACIDO NUCLEICO DIANA EN UNA MUESTRA. SE PROPORCIONAN ASIMISMO PROCEDIMIENTOS PARA LA DETECCION DE LA SECUENCIA DE AMPLIFICACION, INCLUYENDO UN PROCEDIMIENTO DE AMPLIFICACION DE SEÑAL DE HIBRIDACION Y UN PROCEDIMIENTO DE AMPLIFICACION POR RAMIFICACION-EXTENSION. |
