发明名称 一种检测氯霉素的酶联免疫试剂盒
摘要 本发明公开了一种检测氯霉素的酶联免疫试剂盒。本发明所提供的检测氯霉素的酶联免疫试剂盒,包括氯霉素特异性抗体、包被的氯霉素与载体蛋白的偶联物和酶标二抗。本发明的检测氯霉素的酶联免疫试剂盒能同时快速检测大批样品;主要试剂均以工作液形式提供,使用方便,具有高特异性、高灵敏度、高精确度、高准确度等特点,可在动物性食品氯霉素残留检测中发挥重要作用。
申请公布号 CN1308688C 申请公布日期 2007.04.04
申请号 CN200410037259.X 申请日期 2004.04.30
申请人 中国农业大学 发明人 沈建忠;魏书林;史为民;曹振;张素霞;丁双阳;江海洋;刘金凤
分类号 G01N33/547(2006.01) 主分类号 G01N33/547(2006.01)
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 代理人 关畅
主权项 1、一种检测氯霉素的酶联免疫试剂盒,包括氯霉素单克隆抗体或氯霉素多克隆抗体,包被了氯霉素与载体蛋白偶联物的酶标板,辣根过氧化物酶或碱性磷酸酯酶标记的抗鼠或抗兔抗抗体,浓度分别为0、0.01、0.25、2.5、5.0和10.0ng/ml的6瓶氯霉素系列标准溶液,由显色液A液和显色液B液组成的显色剂,浓缩洗涤液,终止液和浓缩复溶液;其中,所述显色液A液为过氧化氢或过氧化脲,所述显色液B液为邻苯二胺或四甲基联苯胺;所述浓缩洗涤液为含有0.8-1.2%吐温的磷酸盐缓冲液;所述浓缩复溶液为0.8-1.2%吐温的柠檬酸盐缓冲液;所述酶标板是用下述方法制备的:用包被缓冲液将氯霉素与卵清蛋白偶联物稀释成0.1-1μg/ml,每孔加入100μl,37℃温育2h,4℃过夜,倾去包被液,用洗涤液洗涤3次,每次1min,拍干,然后在每孔中加入150-200μl封闭液,37℃温育1-2h,倾去孔内液体,干燥后用铝膜真空密封保存;所述包被缓冲液是pH9.6,0.05mol/L的碳酸盐缓冲液;所述封闭液是3-10%小牛血清;利用所述氯霉素系列标准溶液对检测结果进行判定的方法是,将所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值除以第一个标准的吸光度值再乘以100,得到百分吸光度值,以氯霉素浓度的自然对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图,从标准曲线上读出样品的浓度。
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