锯缘青蟹呼肠孤病毒诊断试剂盒及检测方法

摘要

本发明涉及一种诊断试剂盒，具体公开了一种锯缘青蟹呼肠孤病毒诊断试剂盒及检测方法。本发明的试剂盒及检测方法是依据从患病锯缘青蟹中分离到的一株呼肠孤病毒RNA序列设计的一对引物为主体而设计的。本发明采用反转录—聚合酶链式反应(RT－PCR)技术，对锯缘青蟹呼肠孤病毒的特异性RNA核酸片段进行定性检测，简便快速，特异性好，灵敏度高；可用于锯缘青蟹养殖过程中各时期的呼肠孤病毒跟踪检测，也可用于环境监测，避免病毒传播流行，提高科学管理效率，具有很高的实用价值。

主权项

1、一种锯缘青蟹呼肠孤病毒的诊断试剂盒，其特征在于包括下列部件：(1)RNA提取液A液，为Trizol液；(2)RNA提取液B液，为氯仿；(3)RNA提取液C液，为异丙醇；(4)RNA提取液D液，为70％乙醇；(5)RNA提取液E液，为DEPC水；(6)RT反应液F液，包括Buffer、dNTP、随机引物、RNA酶抑制剂、DTT、反转录酶M-MLV RT；(7)RT-PCR反应液G液，包括含mg2+的Buffer、dNTP、正向引物F、反向引物R和Taq酶；F为：5-TTCATTGGCATCCTGACTTT-3，R为：3-CGTTTCCGAGTGGTTTACTT-5；(8)阳性对照H液，为呼肠孤病毒阳性模板。