大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量的ELISA检测方法

摘要

本发明公开了大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量的ELISA检测方法，具体地说涉及一种检测大豆、豆粕及相关产品中大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量的方法。本发明是用等电点沉淀和亲和层析等方法纯化的大豆球蛋白和大豆伴球蛋白分别作为抗原，获得抗大豆球蛋白和大豆伴球蛋白的抗体，将其分别用作间接抑制酶联免疫法法检测大豆、豆粕及相关产品中大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量。本发明的优越性在于这种方法检测准确、过程简单、灵敏度高，可满足相关企业单位批量检测大豆、豆粕及相关产品中大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量的需要。

主权项

1、大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量的ELISA检测方法，在于它使用等电沉淀、盐析和凝胶过滤层析纯化大豆球蛋白和大豆伴球蛋白作为抗原获得抗体，将其分别用作间接抑制酶联免疫法检测大豆、豆粕及相关产品中大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量，其具体步骤如下：1)脱脂大豆粉在缓冲液A中提取得到含大豆球蛋白和大豆伴球蛋白的溶液，2)将溶液pH调至6.4得到沉淀1和上清液。上清pH调至4.8，得到沉淀2，3)将沉淀1溶解在缓冲液B中，过凝胶过滤柱，得到纯化的大豆球蛋白，4)将沉淀2溶解在缓冲液B中，盐析得到沉淀3，5)将沉淀3溶解在缓冲液B中，过凝胶过滤柱，得到纯化的大豆伴球蛋白，6)用大豆球蛋白和大豆伴球蛋白免疫动物，获得抗血清，7)盐析纯化抗体，检测抗体效价，8)用间接抑制酶联免疫法检测大豆、豆粕及相关产品中大豆球蛋白和大豆伴球蛋白含量。