Biosensors, process for obtaining them and their applications

摘要

Procédé de préparation d'un biocapteur constitué par au moins un fragment d'un récepteur de nature protéique, comprenant les étapes suivantes : (a) identification du site actif du récepteur par mutagénèse de l'ensemble ou d'un sous-ensemble des résidus du récepteur, et détermination des variations des paramètres d'interaction avec le ligand (K<Sub>D</Sub>, k<Sub>on</Sub>, k<Sub>off</Sub>) qui sont dues à chaque mutation ou à des groupes limités de mutations ; (b) sélection des résidus Cys ou des résidus à muter en cystéine parmi les résidus du récepteur qui sont situés au voisinage des résidus du site actif le long de la séquence ; (c) mutation dirigée d'au moins l'un des résidus sélectionné en (b), en un résidu Cys, dans le cas où ledit résidu n'est pas naturellement un résidu Cys ; et (d) couplage de l'atome Sγ d'au moins un résidu Cys obtenu en (b) ou en (c) avec un fluorophore.