细菌宿主细胞中稳定地基因扩增的方法

摘要

一种细菌宿主细胞，在其染色体中包含了一种扩增单位的至少两个拷贝，该扩增单位包括：i)目的基因的至少一个拷贝，和ii)可表达的条件性必需基因，该条件性必需基因或者没有启动子，或者由活性显著地低于该基因的内源启动子的异源启动子所转录，而且此条件性必需基因如果失去功能，将造成细胞针对至少一种特定物质的营养缺陷，或使细胞不能利用一种或多种特定的单一碳源；利用本发明的细胞生产蛋白质的方法，及构建本发明的细胞的方法。

主权项

1.一种细菌宿主细胞，其基因组中含有扩增单位的至少两个拷贝，该扩增单位包括：i)目的基因的至少一个拷贝，及ii)可表达的条件性必需基因，该基因或是无启动子的，或是由具有活性显著低于该基因的内源启动子的异源启动子转录的，且如果此条件性必需基因失去功能，则赋予所述细胞针对至少一种特定物质的营养缺陷，或使该细胞不能利用一种或多种特定的单一碳源。