发明名称 一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置及方法
摘要 一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置及方法,系以充填有树脂粒子之管柱将细胞分离,其原理为利用各细胞表面分子物理性质之不同,与管柱中所充填的树脂产生交互作用,因此在管柱中各有不同的滞留时间,进而将不同的细胞分离;是以,本发明所提供分离细胞之装置及方法不需使用抗体及特定的化学药品,可保持细胞的完整性,并可应用于一般血液细胞快速且大量之分离、临床上血癌细胞体内或体外之分离,以及应用于药物开发上,用以研究药物与特定或不特定细胞之交互作用。
申请公布号 TWI266631 申请公布日期 2006.11.21
申请号 TW093139057 申请日期 2004.12.16
申请人 致新医药生技股份有限公司 发明人 张嘉铭
分类号 A61B10/00(2006.01) 主分类号 A61B10/00(2006.01)
代理机构 代理人 江舟峰 台北市中山区长安东路2段81号6楼
主权项 1.一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,包含一管柱及该管柱充填物,该管柱系用以分离不同之细胞族群。2.如申请专利范围第1项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该管柱之材质可为玻璃、塑胶或金属。3.如申请专利范围第1项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该管柱之形状可为圆柱状,该管柱可为毛细管,该管柱直径大小及长度可视需要而改变。4.如申请专利范围第1项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该管柱充填物可为树脂(resin)、聚苯乙烯(polystyrene)或聚氯乙烯(polyvinyl chloride, PVC)。5.如申请专利范围第4项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该管柱充填物可以被化学物质或特定化学官能基所修饰。6.如申请专利范围第5项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该特定化学官能基可为氰基(-CN)、丙基(propyl)、苯基(-phenyl)、氢氧磷灰石(hydroxylapatite)、长碳链(longchain carbon)、可带正电之氨基(NH3)、氮,氮,氮-三甲基(N(CH3)3)、氮,氮-二乙基(N(C2H5)2)、氮,氮-二甲基(N(CH3)2)及可带负电之亚硫酸根(SO3-)、羧基(COO-)等。7.如申请专利范围第5项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该化学物质可为糖基或胺基酸等。8.如申请专利范围第7所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该糖基可为喃基(pyranyl)或喃基(furanyl)或多醣体(polysaccharide)。9.如申请专利范围第7所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该胺基酸可为组成蛋白质之二十种胺基酸。10.如申请专利范围第1项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,其中该细胞可为血液细胞,或是附着细胞(attached cells)经解离(disocciation)后呈悬浮细胞之形式。11.一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的方法,系利用如申请专利范围第1项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的装置,将所欲分离之细胞样品以缓冲液稀释成为一定浓度之细胞悬浮液后,将该细胞悬浮液注入该装置中,再使用缓冲液以固定流速冲提该装置,细胞洗出液以试管收集,依时间间隔或固定细胞洗出液滴数更换收集之试管,再将所收集之细胞进行细胞族群分离之监定,以分析所分离细胞之品质。12.如申请专利范围第11项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的方法,其中该流速系可以自然垂流之方式,或是加一帮浦推动,以提供稳定之流速。13.如申请专利范围第11项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的方法,其中该样品之注入系可以人工或是机器自动注入之方式进行。14.如申请专利范围第11项所述之一种可快速且无梯度密度及无抗体使用之分离细胞的方法,其中该细胞族群分离之监定系可架接细胞计数器以计数细胞数目,或架接利用流式细胞仪进行免疫萤光染色分析。图式简单说明:图一为本发明之操作及原理示意图;图二为有/无外源凝集素(lectin)处理之细胞经小管柱分离后,不同收集时间之细胞数目统计图;图三为白血球浓厚液经小管柱分离后,不同收集时间之红血球细胞数目统计图;图四为白血球浓厚液经小管柱分离后,不同收集时间之白血球细胞数目统计图;图五为经小管柱分离之白血球,其各次族群之细胞百分比统计图;图六为白血球浓厚液经大管柱分离后,不同收集时间之白血球细胞数目统计图;图七为经大管柱分离之白血球,其各次族群之细胞百分比统计图。
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