运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌的方法

摘要

本发明公开了一种运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)的方法，属于细菌检验技术。其技术方案是利用坂崎肠杆菌种特异性DNA序列，设计特异性寡核苷酸引物和探针，分别应用外切酶探针荧光PCR和荧光染料嵌合PCR技术直接从样本中扩增细菌靶基因。本发明包括设计的坂崎肠杆菌种特异性6条寡核苷酸序列，作为对照的两条报告质粒扩增序列，以及与之配套的荧光PCR反应条件。本发明解决了从食品和临床样本中检测坂崎肠杆菌的标准方法，其有益效果是：省略了细菌的反复培养，不需电泳观察，从而节约时间；此外，此法灵敏度更高，检测速度更快，可进行定量分析。

主权项

1.运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌的方法，其特征在于，通过检测荧光染料嵌合PCR反应中所发出的荧光信号进行检测，其引物序列和报告质粒扩增序列如下：荧光嵌合法引物序列1：GGGTTGTCTGCGAATCGCTT荧光嵌合法引物序列2：GTCTTCGTGCTGCGTCAAAC荧光嵌合法报告质粒扩增序列：TCCGTTCTTCTTCGTCATAACTTAATGTTTTTATTTAAAATACCCTCTGAAAAGAAAGGA。