在膜蛋白中插入弗林蛋白酶切割位点及其用途

摘要

在膜糖蛋白域之间插入弗林蛋白酶的切割位点。在高尔基体外侧网络，通过弗林蛋白酶切割，把蛋白分成单个无膜的域，并保留其天然构象。该操作程序可用于生产病毒膜蛋白域，用于结构分析和疫苗试验。

主权项

1.一种生产膜糖蛋白域的方法，其中所述域是无膜的，并且维持天然构象，所述方法包括下述步骤：将弗林蛋白酶切割序列插入将所述膜糖蛋白分成单独域的区域；在宿主细胞中表达所述糖蛋白；用弗林蛋白酶在所述宿主细胞的高尔基体外侧网络中切割所述糖蛋白，由此产生膜糖蛋白域；从所述宿主细胞分泌所述糖蛋白域；和从所述宿主细胞的培养基中纯化所述糖蛋白域，其中所述域是无膜的，并维持天然构象。