鸡传染性支气管炎病毒S1重组蛋白抗原、制备方法及用途

摘要

本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1重组蛋白抗原、制备方法及其用途。这些核苷酸序列分别由SEQID NO.1～3所示。本发明提供了含有编码3种截短S1蛋白的原核表达方法，分别能够表达三株IBV(ZJ971株，M41株，J株)S1蛋白氨基端288bp或309bp部分片段，提供了三株IBV S1蛋白表达产物的纯化方法。用IBV阳性血清检测，表达的部分S1蛋白具有很好的抗原反应性，可作为诊断抗原应用于琼脂扩散诊断技术，酶联免疫吸附试验，免疫荧光检测，免疫组织化学检测等检测IBV感染或免疫产生的抗体。此外，表达的部分S1蛋白还可进一步制备单克隆抗体、多克隆抗体利用ELISA等实验方法来检测IBV抗原的存在或配以适当疫苗佐剂制备亚单位疫苗。

主权项

1.一种鸡传染性支气管炎病毒S1重组蛋白抗原、其特征在于：IBV核糖核酸为模板，通过反转录聚合酶链式反应扩增获得截短IBV S1核苷酸序列，并克隆于大肠杆菌原核表达载体pET-28a，转化入大肠杆菌BL21宿主细胞后用IPTG诱导表达，经Ni-NTA Argarose纯化，获得截短表达的IBV S1蛋白抗原。