miRNA检测方法及试剂盒

摘要

本发明涉及一种miRNA及其前体RNA的检测方法及检测试剂盒。其检测方法是提取细胞总RNA或小分子RNA，经多聚核苷酸聚合酶在RNA分子3’端加上Poly(A)，再由oligodT－接头引物进行反转录获得cDNA，以miRNA或其前体的相关序列和接头引物的互补序列为多聚酶链反应(PCR)引物，扩增获得相应的miRNA和其前体RNA。检测试剂盒由RNA加Poly(A)尾反应系统、反转录系统和PCR扩增系统和对应的引物组成。本方法具有简便、快速和适于大量样本检测的优点。本方法可用于miRNA及其前体的表达分析、克隆研究以及临床标本检验。

主权项

1.一种miRNA及其前体检测方法，其特征在于其检测方法是基于细胞和组织总RNA或小分子RNA的纯化，经多聚核苷酸聚合酶在RNA分子3′端加上Poly(A)，再由oligo(dT)12-30 —接头引物进行反转录获得cDNA，以miRNA或其前体相关序列和接头引物的可补序列为多聚酶链反应(PCR)引物，扩增获得相应的miRNA或其前体的DNA片段。