兰属植物种子无菌萌发与植株培育方法

摘要

本发明是一种兰属植物种子无菌萌发与植株培育方法。采得沉香虎头兰兰株、黄蝉兰兰株、碧玉兰兰株在资源圃内培育至兰花果实到九成熟。培养方法：经外植体处理，改良的培养基对种子进行培养，待种子萌发后长出芽和长出带根毛的幼根时，转接培养，快速增殖，生根培养，一个月后即长出新根。传统的兰花繁育主要以分株繁殖为主，而分株繁殖系数底，每年老苗与新生苗的比例只为1∶1～3左右，很难进行规模化生产。本发明用现代生物技术可用一个芽在一年中繁殖出数十万株兰花，从而满足兰花产业化需求；还可进行脱毒技术操作，生产出无病毒种苗，从而可降低兰花生产的成本和提高产品质量，有效满足兰花产业化生产的巨大需求。

主权项

1.一种兰属植物种子无菌萌发与植株培育方法，其特征在于按以下步骤进行：1)材料来源：采得沉香虎头兰兰株、黄蝉兰兰株、碧玉兰兰株在资源圃内培育至兰花果实到九成熟，果皮略显黄色时摘取；2)培养方法：①外植体处理：将上述90％成熟度果实用75％酒精消毒40秒，转入1％升汞表面消毒8～12分钟，无菌水冲洗3～4次，无菌室取出种子并用纱布包好种子后，以少量无菌水润洗5次，然后用0.1mol/L KOH溶液预处理8分钟，用无菌水冲洗3次，在饱和漂白粉上清液中消毒10～20分钟，无菌水冲洗5次后，接种到固体培养基；②培养基：用MS+6-BA1.0～2.0mg.L-1+NAA0.5～1.0mg.L-1培养基，将种子接种在此培养基上培养；③培养条件：在整个培养过程中，种子无菌萌发采用暗箱培养，圆球茎成苗的培养、增殖和生根培养均采用光照培养，培养条件为：温度25±2℃，光照1800～2500勒克斯(lx)，每天光照12～15小时，培养基pH5.4，琼脂7g/L，待种子萌发后长出芽和长出带根毛的幼根时，转接培养；④转接：对圆球茎进行转接，即从一个培养瓶转到另一个培养瓶的；⑤快速增殖：当圆球茎长到1cm左右，再转到增殖培养基1/2MS+6-BA1.5～2.5mg.L-1+NAA0.2～0.5mg.L-1+香蕉泥70～80g/L培养中进行增殖培养；⑥生根培养：将增殖培养后的苗培养到5～8cm高，从基部切下，转到生根培养基1/2MS+10-6Y2或10-6Y1中，一个月后即长出新根。