用基因变异的酵母Yarrowia Lipolytica制造柠檬酸的生物技术方法

摘要

本发明涉及用一基因变异的酵母YarrowiaLipolytica以生物技术制造柠檬酸的方法，此处将一个对异柠檬酸裂解酶活性编码的基因序列稳定地多重整合在酵母基因组中，本发明的优点在于使不希望生成的副产物异柠檬酸明显减少。

主权项

1.在Y.Lipolytica的酵母细胞中制造柠檬酸的生物技术方法，其步骤为：a)酵母细胞的转化，它有一个对多重基因整合的适宜载体，该载体包含一个作为选择标记物作用的基因；b)酵母是在一个碳源和营养缺乏条件下培养的；c)柠檬酸的净化，其特征在于，该载体含有对1CL活性编码基因序列的表达盒带，克隆是在一适当的营养培养基中选择的，它稳定地在其基因组中整合了对1CL活性编码基因顺序的和选择标记物的多个拷贝。