人肿瘤抗原P185<SUP>HER－2</SUP>的制备和检测方法

摘要

本发明可溶性p185^HER-2抗原的双抗体夹心ELISA检测方法，特征在于将经纯化的、用表面表位包埋法制备的p185^HER-2单克隆抗体作包被抗体结合于固相支持物上，分别将含有可溶性p185^HER-2的样品和纯化的已知浓度的p185^HER-2标准抗原与包被的抗体温育，再用另一种经纯化的、辣根过氧化物酶标记的、用表面表位包埋法制备的p185^HER-2单克隆抗体做检测抗体的夹心ELISA检测方法。所述纯化的p185^HER-2标准抗原是采用表面表位包埋法制备的抗p185^HER-2胞外区的单克隆抗体与Sepharose 4B-ProteinG共价交联的亲和珠对含有p185^HER-2抗原的样品进行亲和层析的方法得到的；本发明检测方法具有检测可溶性p185^HER-2抗原的特异性强、标准可溶性抗原的纯度高的优点；可用于肿瘤血清诊断。

主权项

1、一种标准可溶性p185HER-2抗原的制备方法，包括制备与抗体交联的亲和珠、制备含有p185HER-2抗原的样品、将含有p185HER-2抗原的样品与亲合珠混合、将混合物装柱和洗脱抗原；其特征在于：所述与抗体交联的亲和珠是采用表面表位包埋法制备的抗p185HER-2胞外区的单克隆抗体与Sepharose 4B-ProteinG共价交联的亲和珠。