基于基因组RAPD分析的豇豆品种分子鉴定方法

摘要

本发明公开了一种基于基因组RAPD分析的豇豆品种分子鉴定方法。它通过提取现有各豇豆品种基因组的DNA，将所提取豇豆品种基因组的DNA分别进行聚合酶链式反应，得到随机扩增多态DNA产物，对随机扩增多态DNA产物进行电泳分离，分别得到随机扩增多态DNA标准图谱；将所需要鉴定的豇豆品种按上述步骤进行分析，得到所需要鉴定豇豆品种的随机扩增多态DNA图谱，将此随机扩增多态DNA图谱与标样图谱进行比较判定，得到分析鉴定结果。本发明可以明确区分和判别豇豆的不同品种，实现准确、快速鉴定品种真实性和品种纯度，从而为品种鉴定、种子市场管理、品种保护、播前种子质量控制及良种繁育等提供可靠技术。

主权项

1、一种基于基因组RAPD分析的豇豆品种分子鉴定方法，它包括如下步骤：(1)、提取现有各豇豆品种基因组的DNA；(2)、将所提取豇豆品种基因组的DNA分别进行聚合酶链式反应，得到随机扩增多态DNA产物；(3)、用1.0％的琼脂糖分别对随机扩增多态DNA产物进行电泳分离，EB直接加在凝胶中，总上样量为8μl，其中4μl扩增产物，另加40％蔗糖溶液2μl和0.1％溴酚蓝2μl，在80V下恒压电泳1.5h；(4)、电泳结束后在紫外光检测仪上照相，分别得到随机扩增多态DNA标准图谱；(5)选清晰随机扩增多态DNA图谱采用“0-1”系统记录谱带，将有带的赋值为1，无带的赋值为0；读取每个材料在不同引物扩增产物电泳谱带的数据，建立数据库；(6)、按以不加权成对算术平均值方法进行聚类分析，得到系统聚类树；(7)、将所需要鉴定的豇豆品种按上述步骤进行分析，得到所需要鉴定豇豆品种的随机扩增多态DNA图谱，将此随机扩增多态DNA图谱与标样图谱进行比较判定，得到分析鉴定结果。