酵母表达胸腺肽α1的方法

摘要

一种酵母表达胸腺肽α1的方法，是用PCR法扩增得到含HindⅢ酶切位点和BamHⅠ酶切位点的胸腺肽α1全长基因，经两端内切酶HindⅢ酶和BamHⅠ酶酶切后克隆至啤酒酵母中稳定表达，其表达的胸腺肽α1具有真核细胞的修饰基团，与人体内表达的胸腺肽α1结构一致，具有极好的生物学活性，可用于治疗肿瘤，抗病毒及免疫缺陷病人的辅助治疗及因胸腺功能低下而造成的疾病的辅助治疗，也可作为疫苗增强剂使用。还可直接口服，可用于口服制剂的开发。

主权项

1.一种酵母表达胸腺肽α1的方法，该胸腺肽α1可用于因胸腺功能低下而造成的疾病的辅助治疗，其特征是该方法包括下列步骤：(1)以合成的胸腺肽α1为模板，设计5’GGA AGC TTA CCA TGG GCTCTG ATG CTG CTG TTG 3’上游引物和5’TAT CTA GAT TAT GGA TCC TAGTTC TCA GC 3’下游引物，并在引物上引入HindIII酶切位点和BamH I酶切位点，通过PCR扩增法，得到含HindIII酶切位点和BamH I酶切位点的胸腺肽α1全长基因；(2)以HindIII酶和BamH I酶对胸腺肽α1 PCR产物和pYES2质粒进行酶切，将双酶切后的胸腺肽α1 PCR产物和pYES2质粒在T4连接酶作用下作连接反应，获得胸腺肽α1重组体；(3)将获得的胸腺肽α1重组体转化至啤酒酵母中，使其稳定表达人胸腺肽α1蛋白。