发明名称 可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置及方法
摘要 一种细胞(特别是骨髓间叶干细胞)收集及培养的方法及装置,将曝气用载体及培养细胞用载体放置在针筒型培养槽内,以此针筒型培养槽抽取骨髓间叶干细胞,使骨髓间叶干细胞均匀分布在培养细胞用载体中,然后将针筒型培养槽连接于具有培养基的容器,使容器内的培养基流入针筒型培养槽,然后驱使针筒型培养槽内培养基的液位产生上下移动,以培养骨髓间叶干细胞。
申请公布号 TWI242600 申请公布日期 2005.11.01
申请号 TW090127901 申请日期 2001.11.09
申请人 财团法人工业技术研究院 发明人 张景明;曾雅君;简龙舜;王本甯
分类号 C12M3/02 主分类号 C12M3/02
代理机构 代理人
主权项 1.一种可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,系包括:一培养槽,用以盛装该细胞悬浮液及一细胞培养基,其中,该培养槽包括一细胞悬浮液抽吸装置;至少一细胞培养用载体,系设置于该培养槽内;一容器,内盛装有细胞培养基,且该容器连通于该培养槽,使得该容器内的培养基能流入该培养槽;以及一流体驱动装置,系控制该细胞培养基之液位上下移动,以增加流入该细胞培养用载体之细胞培养基的含氧量。2.如申请专利范围第1项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该培养槽采针筒形状之型态。3.如申请专利范围第2项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该培养槽为单筒型、双筒型及多筒型之一者。4.如申请专利范围第1项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该细胞悬浮液抽吸装置系包括:一针头,连结在该培养槽之底部;一推杆,具有一端部,以可移动方式插入该培养槽内;一活塞,连结于该推杆插入该培养槽之端部。5.如申请专利范围第4项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该活塞系以可分离方式连结于该推杆的端部,且在该活塞上设置有一通气口,当该推杆与该活塞分离时,该培养槽内部即可经由该通气口与大气相连通。6.如申请专利范围第5项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其更包括一空气过滤器,设置在该通气口上,用于阻止微生物进入该培养槽内部。7.如申请专利范围第1项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该培养细胞用载体系由多孔性材料制成。8.如申请专利范围第7项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该多孔性材料系选自多孔性生医材料、生物可分解之多孔性高分子材料、高温烧陶瓷、纤维、不织布及不织物之一者。9.如申请专利范围第8项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该细胞培养用载体之材料系选自胶原蛋白及其共聚物、陶瓷、聚乳酸-甘醇酸、三聚磷酸钙聚合物、聚对苯二甲酸乙酯、亲水性聚胺酯、聚酯、聚醋酸乙烯酯掺合物、聚偏二氯乙烯、聚丁二烯及聚氟碳化合物所组组群之一者。10.如申请专利范围第1项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该细胞培养用载体之上方设有至少一曝气用载体。11.如申请专利范围第10项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该曝气用载体之至少一部分系受该细胞培养基所包覆。12.如申请专利范围第10项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该曝气用载体系由多孔性材料制成。13.如申请专利范围第1项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该流体驱动装置包括:一支架,用于支撑该培养槽或该容器;一动力输出设备,用于使该培养槽或该容器上下移动,因而使该培养槽内之细胞培养基液位上下移动。14.如申请专利范围第13项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该动力输出装置为一马达。15.如申请专利范围第13项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该动力输出装置为一油压缸。16.如申请专利范围第13项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该动力输出装置为一气压缸。17.如申请专利范围第1项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该流体驱动装置包括:一空气帮浦,用于产生空气压力;一电磁阀,连接于该空气帮浦及该容器之间而具有第一、第二操作模式,该电磁阀在第一操作模式时,会启动该空气帮浦产生空气压力迫使细胞培养基注入培养槽而使该细胞培养基的液位上升;而在第二操作模式时,该电磁阀会切断空气帮浦产生的空气压力,致使细胞培养基之液位下降。18.一种可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,系包括:预备一培养槽,用以盛装该细胞悬浮液及一细胞培养基,在该培养槽内设置有一培养细胞用载体;其中,该培养槽包括一细胞悬浮液抽吸装置;经由该细胞悬浮液抽吸装置引流该细胞悬浮液至设置于培养槽内之细胞培养用载体;提供一容器,内盛装有培养基,将该容器连通于该培养槽,使得该培养基能流入该培养槽,并使该细胞培养用载体之一部分浸于该细胞培养基中;以及驱使该细胞培养基之液位上下移动,以增加该细胞培养用载体内细胞培养基的含氧量。19.如申请专利范围第18项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该培养槽采针筒形状之型态。20.如申请专利范围第18项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该细胞悬浮液抽吸装置系包括:一针头,连结在该培养槽之底部;一推杆,具有一端部,以可移动方式插入该培养槽内;一活塞,连结于该推杆插入该培养槽之端部。21.如申请专利范围第20项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该活塞系以可分离方式连结于该推杆的端部,且在该活塞上设置有一通气口,当该推杆与该活塞分离时,该培养槽内部即可经由该通气口与大气相连通。22.如申请专利范围第21项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其更包括一空气过滤器,设置在该通气口上,用于阻止微生物进入该培养槽内部。23.如申请专利范围第18项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该培养细胞用载体系由多孔性材料制成。24.如申请专利范围第23项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该多孔性材料系选自多孔性生医材料、生物可分解之多孔性高分子材料、高温烧陶瓷、纤维、不织布及不织物之一者。25.如申请专利范围第24项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该细胞培养用载体之材料系选自胶原蛋白及其共聚物、陶瓷、聚乳酸-甘醇酸、三聚磷酸钙聚合物、聚对苯二甲酸乙酯、亲水性聚胺酯、聚酯、聚醋酸乙烯酯掺合物、聚偏二氯乙烯、聚丁二烯及聚氟碳化合物所组组群之一者。26.如申请专利范围第18项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该细胞培养用载体之上方设有至少一曝气用载体。27.如申请专利范围第26项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该曝气用载体之至少一部分系受该细胞培养基所包覆。28.如申请专利范围第26项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该曝气用载体系由多孔性材料制成。29.如申请专利范围第18项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该流体驱动装置包括:一支架,用于支撑该培养槽或该容器;一动力输出设备,用于使该培养槽或该容器上下移动,因而使该培养槽内之细胞培养基液位上下移动。30.如申请专利范围第29项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该动力输出装置为一马达。31.如申请专利范围第29项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该动力输出装置为一油压缸。32.如申请专利范围第29项之可抽吸细胞悬浮液之细胞收集培养方法,其中,该动力输出装置为一气压缸。33.如申请专利范围第18项之可从细胞供应来源抽吸细胞悬浮液之收集培养装置,其中,该流体驱动装置包括:一空气帮浦,用于产生空气压力;一电磁阀,连接于该空气帮浦及该容器之间而具有第一、第二操作模式,该电磁阀在第一操作模式时,会启动该空气帮浦产生空气压力迫使细胞培养基注入培养槽而使该细胞培养基的液位上升;而在第二操作模式时,该电磁阀会切断空气帮浦产生的空气压力,致使细胞培养基之液位下降。图式简单说明:第1图系本发明之骨髓间叶干细胞收集装置的示意图;第2图显示系本发明之骨髓间叶干细胞收集装置于抽取骨髓后之情形;第3图系本发明之骨髓间叶干细胞培养装置之示意图;第4图显示本发明之骨髓间叶干细胞培养装置连结于流体驱动装置之一例;第5图所示为本发明之细胞收集装置之一变化例;第6图所示为本发明之细胞收集装置之另一变化例;第7图所示为本发明之流体驱动装置之一变化例;第8图所示为本发明之流体驱动装置之另一变化例;第9图显示依本发明所做实验,细胞分别在不织布载体(a)以及多孔隙氢氧基磷灰石载体(b, c)上增长的情形;第10图显示依本发明所做实验,经动态培养一个月后,不织布载体上所增长的细胞经Crystal violet染色的结果;第11图显示上述实验之MTT分析结果;第12图显示上述实验所培养之细胞经引导矿化后,细胞中累积的钙离子含量;第13图显示上述实验之Von Kossa染色结果;第14图显示上述实验进行动物实验3个月后,骨质癒合的情形;以及第15图显示以培养皿(petri-dish)做为培养装置所培养之人工组织,进行动物实验3个月后,骨质癒合的情形。
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