日本落叶松微体繁殖的根诱导方法

摘要

本发明涉及一种日本落叶松微体繁殖根诱导方法。即选择日本落叶松无性系的1年生材料，经茎诱导完成后，采用生根培养基，以变温培养和继代繁殖相结合的方法，实现根器官的再生，步骤：1)材料的采集及预处理：水培两周，水温为常温；2)制备改良MS培养基；3)接种腋芽：将水培后芽苞发亮的枝条流水洗涤，剪下腋芽，消毒后通过无菌操作接种于茎诱导培养基中，完成不定茎的伸长生长阶段；4)诱导生根：制备生根培养基，再将所述不定茎转接于生根培养基中，进入根生长阶段；5)变温处理及继代培养：将步骤4)所述不定茎置于变温条件下，进行继代培养，完成根器官的再生。本发明能够加快日本落叶松优良种质材料的繁殖速度和种群数量扩增。

主权项

1.一种日本落叶松微体繁殖的根诱导方法，其特征在于：选择日本落叶松无性系的1年生材料，经茎诱导完成后，采用生根培养基，以变温培养和继代繁殖相结合的方法，实现根器官的再生；具体可按如下步骤操作：1)材料的采集及预处理：选取日本落叶松无性系的1年生枝条，采集时间为冬末至初春间芽苞萌动时、萌动前或萌动后，水培两周，水温为常温；2)微体繁殖培养基的制备：(1)用常规方法制备改良MS培养基；(2)分装培养基并进行高压蒸汽灭菌，冷却后备用；3)接种腋芽：将水培后芽苞发亮的枝条流水洗涤，剪下腋芽，在无菌条件下灭菌后通过无菌操作接种于茎诱导培养基中，完成不定茎的伸长生长阶段；4)诱导生根：制备生根培养基，在所述改良MS培养基中加入植物生长调节物质和/或促进物，加入浓度分别为：植物生长调节物质0.3～1.5毫克/升，促进物1～10克/升，再将步骤3所述不定茎转接于生根培养基中，进入根生长阶段；5)变温处理及继代培养：将步骤4)所述不定茎置于恒温暗光下培养3～5天，然后以光强2000～3000Lux，变温培养5～20周；变温培养的同时对诱导伸长的茎进行继代培养，每次转代时切去底部褐化部分，完成根器官的再生。