主权项 |
1、一种补血草工厂化试管快速繁殖方法,包括外植体培养、继代培养、生根培养和过渡培养,其中:外植体培养:选取从基部抽出的8-12cm花芽,去除其顶部的花穗,切成0.8-1.2cm的含腋芽茎段,常规灭菌后,将茎段接种在下列外植体培养基中:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.3~1.5mg/ml萘乙酸(NAA) 0~0.3mg/ml蔗糖 30000mg/L琼脂粉 7000mg/LpH值 5.4-5.8培养4-6周,控制温度15-28℃,光照强度800-1000勒克斯,每天光照12-15小时;继代培养:筛选经外植体培养出的健壮芽,转接在下列继代培养基中:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.2~0.6mg/ml培养3-4周,使之长成外部叶均包含腋芽的芽;过渡培养:将生根苗移栽至下列栽培土中:腐殖土∶红土=1□1,控制遮荫度50-70%,注意通风保湿,3-4周后,即可移栽大田;其特征在于:切芽:在继代转接时,选择叶内包裹的腋芽,在腋芽基部水平切芽,切下的芽的切口平整、均匀,不带愈伤组织,且切下的芽只有一对嫩叶包裹着生长点,切下的芽转入生根培养,其余部分转入继代培养;生根培养:将切下的芽转接在下列生根培养基中:50%的MS基本培养液α-萘乙酸(NAA) 0.1~0 3mg/ml蔗糖 20000mg/L琼脂粉 5000mg/L水解酪蛋白(CH) 100mg/LpH值 5.4-5.8在室温及无光照条件下,培养4-5天,待芽切口周围分化出根原基后,在强度为800-1000勒克斯的光照条件下,每天光照12-15小时,培养4-5天,待芽基部长满4-5mm的放射状根,芽上部长出4-6片叶后,进行移栽。 |