使用纯化的抗原特异性抗体快速检测肺炎链球菌的体外方法和材料

摘要

公开了一种从肺炎链球菌获得含蛋白质低于10％的C-多糖细胞壁抗原的方法。将如此获得的抗原和一间隔臂分子偶联，然后将后者的自由端和层析亲和柱偶联。然后利用该柱纯化肺炎链球菌的粗抗体，从而产生抗原特异性的抗体。将这些抗体的一部分和标记试剂偶联，当抗体和它们嵌入免疫层析试验装置第一区带中的抗原结合伙伴反应时，标记试剂显示可见的颜色变化。这些抗体的另一部分和该装置的观察窗反应区带结合。当液体样品，如病人尿、脑脊髓液或血液被加到第一区上时，抗体和标记试剂的偶联物和样品沿滤纸材料的流动条流到反应区，如果样品含有肺炎链球菌或其细胞壁抗原，则标记的偶联物、抗原和结合的抗体中形成了夹心，观察到颜色的变化。如此进行的免疫层析试验在约15分钟内完成。该试验可快速可靠的诊断各种肺炎链球菌引起的疾病状态，如肺炎、支气管炎、中耳炎、鼻窦炎、脑膜炎和当该细菌引起的初次肺部感染持续3-5日不消除时常见的二级疾病状态。

主权项

1.一种体外检测液体中肺炎链球菌或其细胞壁C-多糖存在的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(a)从肺炎链球菌培养物获得蛋白质含量低于10％的纯化的细胞壁C-多糖抗原；(b)使所述蛋白质含量低于10％的纯化的细胞壁C-多糖抗原与层析亲和柱偶联；(c)使在动物中产生的针对肺炎链球菌或其C-多糖细胞壁抗原的多克隆抗体通过所述柱，以产生纯化的抗原特异性抗体；和(d)对怀疑含有肺炎链球菌的液体样品进行试验，该试验包括步骤：使液体样品与含有作为基本成分的步骤(c)的纯化的抗原特异性抗体的检测试剂接触，所述抗体部分与标记偶联，或部分与标记不偶联，或完全不与标记偶联，检测试剂和样品接触导致可检测的物理或化学变化，来检测肺炎链球菌C-多糖细胞壁抗原存在不存在。