一种新型的产植酸酶基因工程菌及其培养方法

摘要

本研究属于生物技术领域。采用PCR技术对来源于自主分离隆的黑曲霉(Arpergillusniger)N25的植酸酶phyA基因(GenBank注册号AF218813)的表达片段进行定点突变，构建含突变基因phyA^m的酵母表达载体pPIC9k－phyA^m，转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，获得重组基因工程酵母菌株PP－NP^m－8。该菌种经传代实验证实具有良好的遗传稳定性。本实验室以植酸酶phyA^m基因重组酵母菌株PP－NP^m－8工程菌为对象。研究了麦芽汁培养基和麦芽高温浸提培养基。培养基成本比BMGY/BMMY降低了218倍。对基因工程菌PP－NP^m－8的培养方法进行研究，获得最佳种龄、接种量、诱导时间、培养基pH、甲醇诱导浓度。在此条件下所培养的工程菌酶活可达85067U/ml(在37℃、pH4.6的条件下，1分钟内从0.0051mol/L的植酸钠溶液中释放出1nmol无机磷所需要的植酸酶量为一个酶活性单位)。

主权项

1.一种经人工改造的基因工程菌PP-NPm-8，其特征是具有产生高比活植酸酶的能力。