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Biosensor que comprende: un sistema de electrodos que incluye un electrodo de trabajo (4) y un contraelectrodo (5), para formar un sistema de medición electroquímico mediante la puesta en contacto con una solución de muestra suministrada; un elemento de soporte eléctricamente aislante (1, 21, 22, 31, 32) para soportar dicho sistema de electrodos; una primera capa reactiva (7) formada en dicho electrodo de trabajo (4); y una segunda capa reactiva (8) formada en dicho contraelectrodo (5), en el que dicha primera capa reactiva (7) no contiene ninguna enzima, pero contiene por lo menos un mediador electrónico, y dicha segunda capa reactiva (8) no contiene ningún mediador electrónico, pero contiene por lo menos una enzima.
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