主权项 |
1、一种切花百合组培种苗一次成苗的方法,其特征在于它采用下列步骤:A、取材及灭菌:将准备接种的鳞茎在4~5℃温度下处理6~8周,清洗,剥去鳞茎外皮及外部2~3层鳞片,用75%的酒精浸泡30~60秒,然后在0.1~0.2%的升汞(Hgcl2)溶液中处理15~20分钟,1~2%的次氯酸钠溶液中处理10~15分钟,无菌水洗3~4次后,进行切块或段接种:B、诱导培养:在无菌条件下,将处理好的外植体切块或段接种到下列诱导培养基中培养20~25天,使切口产生白色的愈伤组织及小鳞茎突起即不定芽:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 10~2.0mg/L萘乙酸(NAA) 0.1~0.5mg/L蔗糖 30000mg/L琼脂 5500mg/LC、增殖培养:在无菌条件下,将上述诱导出的愈伤组织及不定芽分切后转入下列增殖培养基中,在温度为26±2℃,光照时间10~12小时/天,光照强度1500~2000Lx的条件下,培养15~20天,使小鳞茎增殖,并抽出叶片,成为幼苗:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.5~1.0mg/L萘乙酸(NAA) 0.2~0.5mg/L蔗糖 30000mg/L琼脂 5500mg/LD、光独立生根培养:在常规室温下,将增殖培养20天,具1对叶以上,高2.0cm的幼芽切下,插入下列培养基中:MS改良培养液萘乙酸(NAA) 0~0.1mg/L蛭石∶培养液 2~3∶1通入气流量为1-5L/min的CO2混合气体,并保持CO2浓度在600~1000ppm,相对湿度80-90%,进行光独立生根培养,培养20天后可得切花百合种苗。 |