一种体外免疫人B淋巴细胞生产人单克隆抗体的方法

摘要

本发明提供了一种用加载抗原的人树突状细胞体外免疫人外周血单个核细胞，然后用EB病毒转化其中的生产特异性抗体的B淋巴细胞进而生产针对上述抗原的人源化单克隆抗体的方法。使用本发明所提供的方法可获得生产针对上述抗原的人源化单克隆抗体的人B淋巴细胞克隆，培养这些人B淋巴细胞就可生产针对各种抗原的、具有临床治疗和临床诊断价值的人源化单克隆抗体。本方法既适用于在实验室水平制备人单克隆抗体，也适用于人单克隆抗体的工业化生产。

主权项

1.一种体外生产人源化单克隆抗体的方法，其特征在于用加载抗原的人树突状细胞免疫人外周血单个核细胞，然后用EB病毒转化其中的生产特异性抗体的B淋巴细胞，以生产针对上述抗原的特异性人源化单克隆抗体；进一步，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)分离、培养与鉴定人树突状细胞；(2)应用抗原加载由上述步骤(1)得到的人树突状细胞；(3)分离人外周血单个核细胞；(4)应用由上述步骤(2)得到的加载抗原的人树突状细胞免疫由上述步骤(3)得到的人B淋巴细胞；(5)应用EB病毒转化由上述步骤(4)得到的被免疫的人B淋巴细胞；(6)克隆化培养由上述步骤(5)得到的转化细胞；(7)应用ELISA方法筛选由上述步骤(6)得到的生产针对上述抗原的特异性单克隆抗体的转化细胞克隆；(8)扩增、保存由上述步骤(7)得到的生产上述特异性单克隆抗体的B淋巴细胞；(9)培养由上述步骤(8)得到的生产上述特异性人单克隆抗体的B淋巴细胞；(10)分离纯化由上述步骤(9)得到的针对上述抗原的特异性人源化单克隆抗体。