HD34－1菌株的构建及以其为发酵菌株酿造无醇啤酒的方法

摘要

HD34－1菌株的构建及以其为发酵菌株酿造无醇啤酒的方法，它涉及一种基因工程菌株的构建及无醇啤酒的酿造方法。HD34－1是这样构建的：a.设计5′端、3′端引物；b.扩增ADH基因；c.与表达载体pYC6/CT连接；d.转化进入Saccharomyces cerevisiae HD34；e.初筛转化子，获得HD34－1菌株，以其为发酵菌株酿造无醇啤酒的方法如下：a.活化菌株；b.将菌种转到培养基中摇瓶培养；c.将扩培菌种接种到含有麦芽汁的发酵罐中；d.充氧、发酵；e.测量糖度，当糖度降到5°BX时停止发酵；f.降温，放置一周后即可出罐。本发明的菌株能催化伯醇和醛的正反应，降低乙醇产量，简化生产工艺。

主权项

1、HD34-1菌株的构建，其特征在于它是这样构建的：a、依据GenBank上登录的ADH基因序列设计5′端、3′端引物，在5′端引物和3′端引物分别加上SacI和BamHI的识别位点GAGCTC和GGATCC；b、采用PCR方法以Bacillus subtilis的基因组DNA作为模板扩增ADH基因；c、将得到的产物与表达载体pYC6/CT连接；d、将构建的重组DNA采用LiAc转化法转化进入Saccharomyces cerevisiae HD34；e、用同工酶方法对所得转化子进行初筛，对初筛后的菌株进行ADH定性检测，获得HD34-1菌株。