一种培养大苞雪莲（S.involucrata）毛状根生产雪莲黄酮类有效成分的方法

摘要

本发明涉及一种利用大苞雪莲雪莲毛状根细胞系及液体培养毛状根生产雪莲黄酮类化合物的方法，该方法涉及如下步骤：取其萌发3天苗龄的绿色子叶置于诱导丛生苗培养基上进行培养，诱导培养获得丛生苗；丛生苗置于苗生长培养基，进行单株培养；单株移置于诱根培养基培养，获得下端长有实生根的苗；有实生根的苗的外植体切段，置于预培养培养基上暗培养，经发根农杆菌介导的进行转化，其外植体于弱光培养诱导发根，出现的毛状根接入筛选培养基上再培养，选择抗Km且甘露碱、PCR检测显阳性的发根根系，切取根尖1~2cm用于进行液体扩大培养，培养物用于干燥、粉碎、有机溶剂分离、提取制备雪莲黄酮类化合物。

主权项

1. 一种用大苞雪莲(S.involucrata)毛状根培育雪莲毛状根系及液体培养毛状根生产雪莲黄酮类化合物的方法，该方法涉及如下步骤：首先萌发大苞雪莲的无菌种子，取其萌发3天苗龄的绿色子叶的子叶柄，置于诱导丛生苗培养基上进行培养，诱导培养获得丛生苗；丛生苗置于苗生长培养基，进行单株培养；单株移置于诱根培养基培养，获得下端长有实生根的苗；有实生根苗的叶片切段为外植体，置于预培养培养基上暗培养，经发根农杆菌介导进行转化，其外植体于弱光培养诱导发根，诱导出的毛状根接入筛选培养基上再培养，选择抗Km且甘露碱、PCR检测显阳性的发根根系，切取根尖1~2cm用于进行液体扩大培养，收获培养物，培养物再进一步通过干燥、粉碎、有机溶剂分离提取工艺分离、提取制备雪莲黄酮类化合物。