脱细胞真皮基质材料的制备方法

摘要

本发明公开了一种脱细胞真皮基质材料的制备方法。其特点是选取健康的动物，在屠宰、剥皮后3小时内，对生皮进行清洗、脱脂等物理、化学处理。然后，利用复合酶皮胶原处理剂以及碱等化学物质对其进行脱毛和纯化，获得具有良好的生物相容性和适当的生物降解速率的脱细胞真皮基质材料。该材料可用于真皮替代物、溃疡皮肤的修复以及整形美容等医疗用途。

主权项

1.一种脱细胞真皮基质材料的制备方法，其特征在于：(1)清洗：选取健康的动物，经屠宰，剥下其皮，取新鲜动物皮100重量份，放入转鼓中，加入常温水200-500重量份，盖上转鼓门，转动30-150min，控干废液，加入常温水200-500重量份，盖上转鼓门，转动30-150min，控干废液，如此反复操作2-6次，然后充分水洗，(2)预脱脂：用温度为40-50℃的热水预热调温，使转鼓中液体的温度达到36-42℃，控干，加入34-42℃的热水200-500重量份，加入平平加0.5-10.0重量份、纯碱0.5-12.0重量份和渗透剂JFC 0.2-1.0重量份，转动30-120min，控干废液，加入温度为30-36℃的热水200-600重量份，转动20-120min，控干废液，再加入温度为30-36℃的热水200-600重量份，转动20-120min，控干废液，如此反复操作2-6次，(3)二次脱脂：用40-46℃的热水预热调温，使转鼓中液体的温度达到36-42℃，控干，加入温度为36-42℃的热水200-500重量份，加入脱脂剂PT-1011.0-10.0重量份，平平加0.2-8.0重量份，洗衣粉0.2-10.0重量份，转动30-240min，控干废液，再加入温度为30-36℃热水200-600重量份，转动20-120min，控干废液，如此反复操作2-6次，然后，控干废液，(4)预热：用40-46℃的热水预热调温，使转鼓中液体的温度达到24-30℃，控干废液，取出动物皮，立即放入专用恒温柜中，静置沥水2-8h，要求室温与专用恒温柜中的温度相同，可控制温度为24-32℃，(5)涂酶堆置：沥水达到动物皮的含水量大约为60-65％，将事先配制好的酶糊均匀涂于动物皮的肉面，酶糊的配方为：复合酶皮胶原处理剂E-894 20-100重量份，水10-50重量份，涂好后，肉面对肉面平铺整齐，用塑料薄膜盖严，全部操作均在恒温下进行，堆置时间18-50h，(6)手工去毛：涂酶达到要求后，手工拔去皮板上的针毛和绒毛，(7)清洗：将手工去毛的动物皮放入转鼓中，加入常温水200-600重量份，盖上转鼓门，转动30-180min，控干废液，加入常温水200-600重量份，盖上转鼓门，转动30-180min，控干废液，如此反复操作2-6次，加入NaCl5-30重量份，加入常温水100-400重量份，转动30-240min，控干废液，加入常温水200-600重量份，盖上转鼓门，转动30-180min，控干废液，再按上述方法重复操作2-6次，然后，充分水洗，控干废液，(8)拔毛：清洗、水洗后，加入温度为20-30℃水100-400重量份，加入氢氧化钠0.5-10.0重量份，转动30-240min，用镊子除去残留在每块动物皮上的针毛及绒毛，(9)剖层：动物皮上的残留针毛及绒毛完全除去干净后，在精密剖层机上剖层，剖层厚度：带粒面的头层皮剖层厚度为0.4-1.0mm；不带粒面的二层皮剖层厚度为0.4-1.2mm，剩余部分回收用作提取皮胶原的原料，(10)脱碱：取带粒面的头层皮或不带粒面的二层皮100重量份，加入乳酸0.2-3.0重量份，氯化铵1.0-6.0重量份，或硫酸铵0.6-6.0重量份，转动30-180min，控去废液，(11)清洗：加入常温水200-600重量份，NaCl 5-30重量份，转动30-240min，控干废液，加入常温水200-600重量份，转动30-150min，控干废液，按上述方法重复操作2-6次，然后，充分水洗，控干废液，将皮从转鼓中取出，用离心机脱水，再将皮放入转鼓中，加入去离子水200-60重量份，转动30-180min，控干废液，按此方法重复操作2-6次，然后，将皮从转鼓中取出，用离心机脱水，(12)将经脱水的动物皮，放入冷冻干燥机的冷冻室内冻干后，再经剂量为6.0-30.0KGy/h60Co所产生的γ射线辐照消毒灭菌、成型包装，即为成品。