用于治疗肿瘤的细胞疗法

摘要

免疫系统无应答的人的T细胞应答常常减弱。我们开发了一种分离、刺激和扩增针对抗原特异性效应细胞的原初细胞毒性T淋巴细胞前体(CTLp)的方法，能够体内裂解肿瘤细胞。该活体外方法产生完全功能化的效应细胞。用人I类HLA分子和限定性辅助分子转染人工抗原提呈细胞(AAAPC；果蝇)，使用其刺激正常供体和癌症患者的CD8+T细胞。在果蝇细胞表面高密度表达的I类分子是空的，使得可以有效装载多种肽，这导致产生识别内源性表达特定肽的肿瘤细胞的多克隆应答。如果肽表位是确定的免疫原，则产生的应答是强烈的、抗原特异性的和可重复的应答。这种人工抗原表达系统可适于治疗绝大多数人的大多数癌症。

主权项

1.一种治疗癌症患者的方法，该方法包括：a.制备一种非天然抗原提呈细胞系(nnAPC)，其中所述nnAPC能够同时提呈高达约15种不同的所述癌症相关肽分子，其中所述肽分子每个约6-12个氨基酸长b.收集所述患者或合适供体的CD8+细胞；c.用所述nnAPC细胞系刺激所述CD8+细胞；d.将所述CD8+细胞加入含选自IL-2、IL-7的细胞因子的培养基中或条件生长培养基(CGM)中，其中所述细胞因子可单独或组合使用；e.将收集自所述患者或合适供体的非悬浮外周血单核细胞或者去除了CD-8的外周血单核细胞与1-50μg/ml的一种所述nnAPC可同时提呈的所述肽混合；f.用剂量必须足以杀死悬浮液中需要的外周血单核细胞除外的所有组分的γ-射线照射所述外周血单核细胞悬浮液；g.分离粘附外周血单核细胞；h.将约1μg/ml至50μg/ml的所述每种肽装载至所述粘附外周血单核细胞；i.以约10个CD8+细胞/1个外周血单核细胞的比率混合所述CD8+细胞和所述粘附外周血单核细胞；j.用CD8+悬浮液接种所述患者。