水泡性口炎病毒N基因重组表达质粒载体、表达抗原以及制备方法

摘要

本发明涉及一种用于制备水泡性口炎病毒VSVN蛋白重组抗原诊断试剂，以及制备方法。本制剂包括水泡性口炎病毒VSV N基因重组表达质粒载体以及由其表达所获得的水泡性口炎病毒VSV N蛋白重组抗原，其制备方法为：一、将VSV编码群特异性抗原N基因片段克隆至pMD18－T质粒载体中，构建N基因克隆重组质粒；二、亚克隆插入pBAD/ThioTOPO表达载体；三、转化TOP10细胞；四、筛选获得VSV N基因片段正向插入、有正确读码框的阳性克隆，即构建了VSV群特异性抗原N的重组表达载体。本制剂可稳定、高效表达具有良好反应原性的VSV N重组抗原，可作为水泡性口炎诊断试剂。

主权项

1、一种水泡性口炎病毒N基因重组表达质粒载体，其特征在于命名为pBAD-VN5重组表达质粒载体，其表达N融合蛋白的核苷酸序列为：GCTCCTACAGTTAAGAGAATCATTAACGACTCAATTATTCAGCCGAAATTACCGGCCAACGAGGATCCGGTCGAATACCCGGCTGATTACTTCAAAAATAATACCAATATAGTATTGTATGTGAGCACCAAAGTGGCACTAAATGATTTGAGAGCATACGTATACCAGGGTATCAAGTCCGGTAATCCATCCATCCTCCACATAAATGCTCATCTCTATGCTGCATTAAAGGGAGTGGAAGGAACTTTAGACAGAGACTGGATTAGCTTTGGAAGAACAATTGGAAAGAGAGAGGAGAATGTGAAAATTTTCGATCTAGTGAAAGTTGAAGAACTGAAGACAGCACTTCCTGATGGGAAATCAGACCCTGACCGTTCTGCTGAGGATGATAAATGGCTTCCCATCTACATCCTAGGTCTTTACAGAGTGGGCAGATCTAAAGTTACGGATTACAGAAAGAAACTACTGGACGGGCTTGAAAATCAGTGCAAAGTGGCGTCAACCAGATTTGAGAGTCTAGTCGAGGATGGTCTCGACTTCTTTAACATATGGGAGAATGATCCAAATTTCACCAAGATAGTTGCTGCAGTGGATATGTTCTTCCACATGCTCAAAAAGCATGAACGTGCTCCAATCAGATACGGAACCATAGTCTCAAGATTCAAGGACTGTGCAGCACTTGCAACATTTGGGCATCTCAGCAAAGTCAGTGGACTCTCAATTGAGGAACTCACAACATGGGTCCTGAATAGGGAAGTTGCAGACGAGCTATGCCAGATGATGTATCCGGGTCAAGAAATTGACAAAGCAGATTCATACATGCCGTATATGATTGACTTTGGGTTATCTCAGAAATCCCCATATTCATCAGTGAAGAATCCAGCTTTTCATTTCTGGGGACAACTTGCTGCACTCTTGCTAAGATCAACTCGGGCAAAAAATGCTAGACAGCCTGACGACATCGAATACACTTCACTAACTTGCGCAAGTTTACTGCTGTCATTTGCTGTTGGGTCCTCAGCAGACATTGAACAGCAGTTCTATATTGGAGAAGACAAATACACAACAGAAAAAGATGATGGTCTGAAGAAATCAGATGTCCCACCAAAAGGAAGAAATGTCGTGGACTGGCTTGGCTGGTATGATGACAATGGGGGAAAACCCACACCAGATATGCTCAACTTCGCAAGAAGAGCAGTCAACTCTCTGCAGTCACTTCGTGAAAAGACAATTGGCAAATACGCAAAAGTAGAATTTGACAAA。