发明名称 |
人严重急性呼吸道症候群免疫球蛋白的分离提纯方法 |
摘要 |
本发明为一种人严重急性呼吸道症候群免疫球蛋白的分离提纯方法,包括如下步骤:(1)血浆病毒灭活;(2)分离血浆组分FI+II+III:(3)分离血浆组分FII;(4)将血浆组分FII用柱层析法提纯;(5)中间制品除病毒;(6)收获产品原液,检定合格后除菌过滤分装,即得。本发明与现有的特异性免疫球蛋白的提纯方法相比,应用了柱层析法,使产品纯度更高,稳定性更好,首创原料血浆进行S/D病毒灭活、半成品再除病毒的双重病毒灭活工艺,给病毒灭活增加了双保险。本发明首次利用治愈的SARS感染者或经SARS疫苗免疫后的献浆员的血浆来提取特异性的人SARS免疫球蛋白,药效试验证明SARS中和抗体效价水平高于1:200,是预防和治疗SARS的安全有效的特效药物。 |
申请公布号 |
CN1519257A |
申请公布日期 |
2004.08.11 |
申请号 |
CN03140408.1 |
申请日期 |
2003.09.02 |
申请人 |
深圳市卫武光明生物制品有限公司 |
发明人 |
洪计灵;张信;郭采平;张战;李昆成;张剑平;李冲之;杨海峰;丁玉江;谢亦武 |
分类号 |
C07K16/18;C07K16/44;C07K1/36 |
主分类号 |
C07K16/18 |
代理机构 |
深圳市中知专利代理有限责任公司 |
代理人 |
宋湘红 |
主权项 |
1.一种人严重急性呼吸道症候群免疫球蛋白的分离提纯方法,其特征在于包括如下顺序的步骤:(1)血浆S/D病毒灭活:把原料血浆融化后,加入体积百分含量为0.3%~1%的磷酸三丁酯和0.8%~1.2%的TRITON-X100,在18~26℃下处理1~6小时;(2)分离血浆组分FI+II+III,即血浆中的纤维蛋白原,八因子(FVIII),Clq,Clr,Cls,纤维蛋白原+γ-球蛋白,二因子(FII),七因子(FVII),九因子(FIX),十因子(Fx),α、β-球蛋白,铜蓝蛋白:调节悬液参数,即调节PH至5.80~6.10,加入乙醇使乙醇的浓度为20%±1%,在-4.0℃~-6.0℃下,反应至少2小时,然后离心或压滤法分离血浆组分FI+II+III沉淀;(3)分离血浆组分FII:将前步所得血浆组分FI+II+III沉淀用注射用水溶解,调节pH至4.80±0.05,反应至少1小时,再调节PH至5.20~5.45,调节电导率为0.9~1.3ms/cm,加入乙醇使其浓度为14%±1%,在-3℃~-5℃下,反应至少2小时,然后离心过滤或压滤法分离悬液上清和沉淀,按上清量的1/20体积加入1mol/L的氯化钠溶液,调节上清的PH至7.10~7.4,加入乙醇使其浓度为25%±1%,在-7℃~-12℃下,反应至少2小时,然后离心过滤或压滤法分离出FII沉淀,用注射用水溶解稀释;(4)层析:将前步所得的血浆组分FII制品通过柱层析,把层析液超滤浓缩;(5)把前步所得中间制品除病毒。(6)收获产品原液,检定合格后除菌过滤分装。 |
地址 |
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