衬底介导的膜蛋白在脂双层中的重组方法

摘要

本发明公开了一种衬底介导的膜蛋白在脂双层中的重组方法，该方法将膜蛋白经纯化后与磷脂混合，然后将该溶液滴于衬底表面，液滴中的蛋白和磷脂同时吸附在衬底表面，磷脂在衬底表面自发形成脂双层并迅速铺展，将蛋白镶嵌其中，用缓冲液冲洗表面，洗去吸附不牢固的蛋白和磷脂，在衬底表面即为重组了蛋白的脂双层。本发明的方法步骤简单，方便快速，能够形成有支撑的脂双层，适用于各种膜蛋白，特别适用于结构复杂、易于水解的膜蛋白。

主权项

1.一种衬底介导的膜蛋白在脂双层中的重组方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)将纯化后的膜蛋白与磷脂混合，该溶液中蛋白和磷脂的摩尔比为1∶102～1∶107；(2)将该溶液滴于云母衬底表面，于温度15～40℃的条件下，在孵育槽中孵育，液滴中的蛋白和磷脂同时吸附在云母衬底表面，然后用缓冲液冲洗表面，洗去吸附不牢固的蛋白和磷脂，在云母衬底表面即为重组了蛋白的脂双层。