| 主权项 |
1.一种在活体外增加以逆转录病毒将基因转移至 目标细胞之效率的方法,其特征为改良包含藉着在 有效量具有逆转录病毒结合域之功能性物质(其系 选自纤连蛋白之肝素-Ⅱ结合域、纤维母细胞生长 因子、胶原蛋白及聚离胺酸),和有效量具有目标 细胞结合域之另一功能性物质(其系选自纤连蛋白 细胞结合区域多、促红血球生成素、可与CD抗 原结合之抗体及高甘露糖型糖链)之混合物存在下 ,以逆转录病毒感染目标细胞以进行转导。2.根据 申请专利范围第1项之方法,其中该纤连蛋白细胞 结合域多系对于VLA-5及/或VLA-4之结合域多。3. 根据申请专利范围第1或2项之方法,其中该功能性 物质系经固定者。4.一种用于以逆转录病毒将基 因转移至目标细胞之目标细胞培养基,其特征为包 含有效量具有逆转录病毒结合域之功能性物质(其 系选自纤连蛋白之肝素-Ⅱ结合域、纤维母细胞生 长因子、胶原蛋白及聚离胺酸),以及有效量具有 目标细胞结合域之另一功能性物质(其系选自纤连 蛋白细胞结合区域多、促红血球生成素、可与 CD抗原结合之抗体及高甘露糖型糖链)之混合物。5 .根据申请专利范围第4项之培养基,其中该纤连蛋 白细胞结合域多系对于VLA-5及/或VLA-4之结合域 多。6.根据申请专利范围第4或至5项之培养基, 其中该功能性物质系经固定者。7.一种用于进行 由逆转录病毒仲介进入目标细胞之基因转移之套 组,其特征为该套组包含: (a)有效量具有逆转录病毒结合域之功能性物质(其 系选自纤连蛋白之肝素-Ⅱ结合域、纤维母细胞生 长因子、胶原蛋白及聚离胺酸)及/或有效量具有 目标细胞结合域之另一功能性物质(其系选自纤连 蛋白细胞结合区域多、促红血球生成素、可与 CD抗原结合之抗体及高甘露糖型糖链); (b)用于培养逆转录病毒及目标细胞之人造物质;及 (c)用于预刺激目标细胞之目标细胞生长因子。8. 根据申请专利范围第7项之套组,其中该纤连蛋白 细胞结合域多系对于VLA-5及/或VLA-4之结合域多 。9.根据申请专利范围第7或8项之套组,其中该 功能性物质系经固定者。10.一种在活体外增加以 逆转录病毒将基因转移进入目标细胞之效率的方 法,其特征为改良包含藉着在有效量之于同一分子 上同时具有目标细胞结合域之功能性物质功能性 物质(其系选自纤连蛋白细胞结合区域多、促红 血球生成素、可与CD抗原结合之抗体及高甘露糖 型糖链)及逆转录病毒结合域(其衍生自纤维母细 胞生长因子、胶原蛋白或聚离胺酸)之存在下,以 逆转录病毒感染目标细胞以进行转导。11.根据申 请专利范围第10项之方法,其中该纤连蛋白细胞结 合域多系对于VLA-5及/或VLA-4之结合域多。12. 根据申请专利范围第10项之方法,其中该纤维母细 胞生长因子系选自由序列表中序列编号No.3表示之 纤维母细胞生长因子及含有该因子之多:13.根据 申请专利范围第10项之方法,其中该功能性物质系 具有由序列表中序列编号No.4或5表示之胺基酸序 列的多:14.根据申请专利范围第10项之方法,其中 该胶原蛋白系选自衍生自第Ⅴ类胶原蛋白之含有 胰岛素结合域之胶原蛋白片段及含有该片段之多 。15.根据申请专利范围第14项之方法,其中该衍 生自第Ⅴ类胶原蛋白之含有胰岛素结合域之胶原 蛋白片段系具有由序列表中序列编号No.6表示之胺 基酸序列之片段:16.根据申请专利范围第10项之方 法,其中该功能性物质系具有由序列表中序列编号 No.7或8表示之多:17.根据申请专利范围第10至21项 中任一项之方法,其中该功能性物质系经固定者。 18.根据申请专利范围第10至21项中任一项之方法, 其中该功能性物质系未经固定使用。19.一种用于 以逆转录病毒将基因转移至目标细胞之目标细胞 培养基,其特征为包含有效量于同一分子上同时具 有目标细胞结合域之功能性物质(其系选自纤连蛋 白细胞结合区域多、促红血球生成素、可与CD 抗原结合之抗体及高甘露糖型糖链)及逆转录病毒 结合域(其衍生自纤维母细胞生长因子、胶原蛋白 或聚离胺酸)。20.根据申请专利范围第19项之培养 基,其中该纤维母细胞生长因子系选自由序列表中 序列编号No.3表示之纤维母细胞生长因子及含有该 因子多:21.根据申请专利范围第19项之培养基,其 中该功能性物质系具有由序列表中序列编号No.4或 5表示之胺基酸序列的多:22.根据申请专利范围 第19项之培养基,其中该胶原蛋白系选自衍生自第 Ⅴ类胶原蛋白之含有胰岛素结合域之胶原蛋白片 段及含有该片段之多。23.根据申请专利范围第 19项之培养基,其中该衍生自第Ⅴ类胶原蛋白之含 有胰岛素结合域之胶原蛋白片段系具有由序列表 中序列编号No.6表示之胺基酸序列之片段:24.根据 申请专利范围第19项之培养基,其中该功能性物质 系具有由序列表中序列编号No.7或8表示之多:25. 根据申请专利范围第19至24项中任一项之培养基, 其中该功能性物质系经固定者。26.一种用于进行 由逆转录病毒仲介进入目标细胞之基因转移之套 组,其特征为该套组包含: (a)有效量在同一分子上同时具有目标细胞结合域( 其系选自细胞黏着蛋白、荷尔蒙、细胞因子、抗 体、糖链及碳水化合物)之功能性物质及逆转录病 毒结合域(其衍生自纤维母细胞生长因子、胶原蛋 白或聚离胺酸); (b)用于培养逆转录病毒及目标细胞之人造物质;及 (c)用于预刺激目标细胞之目标细胞生长因子。27. 根据申请专利范围第26项之套组,其中该纤维母细 胞生长因子系选自由序列表中序列编号No.3表示之 纤维母细胞生长因子、该因子之功能性当量物、 及含有该因子或其功能性当量物之多者:28.根据 申请专利范围第26项之套组,其中该功能性物质系 具有由序列表中序列编号No.4或5表示之胺基酸序 列的多:29.根据申请专利范围第26项之套组,其中 该胶原蛋白系选自衍生自第Ⅴ类胶原蛋白之含有 胰岛素结合域之胶原蛋白片段、该片段之功能性 当量物、及含有该片段或其功能性当量物之多 。30.根据申请专利范围第29项之套组,其中该衍生 自第Ⅴ类胶原蛋白之含有胰岛素结合域之胶原蛋 白片段系具有由序列表中序列编号No.6表示之胺基 酸序列之片段:31.根据申请专利范围第26项之套组, 其中该功能性物质系具有由序列表中序列编号No.7 或8表示之多:32.根据申请专利范围第26至31项中 任一项之套组,其中该功能性物质系经固定者。33. 根据申请专利范围第3或17项之方法,其中该功能性 物质系固定于玻珠之上。34.根据申请专利范围第6 或25项之培养基,其中该功能性物质系固定于玻珠 之上。35.根据申请专利范围第9或32项之套组方法, 其中该功能性物质系固定于玻珠之上。36.一种在 活体外增加以逆转录病毒将基因转移至目标细胞 之效率的方法,其特征为改良包含在有效量固定于 玻珠上之选自由实质上之纯纤连蛋白、实质上之 纯纤连蛋白片段或其混合物组成之群之功能性物 质存在下,以逆转录病毒感染目标细胞以进行传导 ,其中该纤连蛋白片段包含肝素-Ⅱ结合域及CS-I细 胞黏合域。37.一种在活体外增加以逆转录病毒将 基因转移至目标细胞之效率的方法,其特征为改良 包含在有效量未固定之选自由实质上之纯纤连蛋 白、实质上之纯纤连蛋白片段或其混合物组成之 群功能性物质存在下,以逆转录病毒感染目标细胞 以进行传导,其中该纤连蛋白片段包含肝素-Ⅱ结 合域及CS-I细胞黏合域。38.根据申请专利范围第1 至3.10至18.33.36及37项中任一项之方法,其中该目标 细胞系选自干细胞、造血细胞、非黏着性低密度 单核细胞、黏着细胞、骨髓细胞、造血干细胞、 外周血干细胞、脐血细胞、胎儿造血干细胞、胚 胎形成干细胞、胚胎细胞、原生殖细胞、卵母细 胞、卵原细胞、卵、精母细胞、精子、CD34+细胞 、C-kit+细胞、多能造血祖细胞、单能造血祖细胞 、红血球前体细胞、淋巴细胞前体细胞、成熟血 细胞、淋巴细胞、B细胞、T细胞、纤维母细胞、 神经母细胞、神经细胞、内皮细胞、血管内皮细 胞、肝细胞、肌纤维母细胞、骨骼肌细胞、平滑 肌细胞、癌细胞、骨髓瘤细胞及病性白血球细胞 。39.根据申请专利范围第1至3.10至18.33及36至38项 中任一项之方法,其中该逆转录病毒包括一外源基 因。40.根据申请专利范围第39项之方法,其中该逆 转录病毒系重组逆转录病毒载体。41.根据申请专 利范围第39项之方法,其中该逆转录病毒系复制缺 失型重组逆转录病毒载体。42.一种多,其系由序 列表中序列编号No.13所代表:43.一种基因,其特征为 编码根据申请专利范围第42项之多。44.一种多 ,其特征为其系由序列表中序列编号No.30所代表: 45.一种基因,其特征为编码根据申请专利范围第44 项之多。46.一种多,其特征为其系由序列表中 序列编号No.5所代表:47.一种基因,其特征为编码根 据申请专利范围第46项之多。图式简单说明: 图1系说明以纤维母细胞生长因子、含有纤维母细 胞生长因子之功能性物质、以及纤维母细胞生长 因子与纤连蛋白之细胞结合域多之混合物,将基 因转移进入目标细胞中之基因转移效率之图。 图2系说明以纤维母细胞生长因子、纤维母细胞生 长因子与纤连蛋白之细胞结合域多之混合物、 以及纤连蛋白之细胞结合域多,将基因转移进入 目标细胞中之基因转移效率之图。 图3系说明以胶原蛋白片段、纤连蛋白之细胞结合 域多与胶原蛋白片段之混合物、含有胶原蛋白 片段与纤连蛋白之细胞结合域多之混合物之功 能性物质,将基因转移进入目标细胞中之基因转移 效率之图。 图4系说明以纤连蛋白片段、以及纤连蛋白之细胞 结合域多与纤连蛋白片段之混合物,将基因转移 进入目标细胞中之基因转移效率之图。 图5系说明以纤连蛋白之细胞结合域多、聚离胺 酸、聚离胺酸与纤连蛋白之细胞结合域多之混 合物、纤连蛋白片段、以及纤连蛋白之细胞结合 域多与纤连蛋白片段之混合物,将基因转移进入 目标细胞中之基因转移效率之图。 图6系说明以促红血球生成素衍生物、聚离胺酸、 以及促红血球生成素衍生物与聚离胺酸之混合物, 将基因转移进入目标细胞中之基因转移效率之图 。 图7系说明以促红血球生成素衍生物、纤连蛋白片 段聚合物、以及促红血球生成素衍生物与纤连蛋 白片段聚合物之混合物,将基因转移进入目标细胞 中之基因转移效率之图。 图8系说明以固定纤连蛋白片段之玻珠、固定纤连 蛋白细胞结合域多之玻珠、以及固定纤连蛋白 片段与纤连蛋白细胞结合域多之混合物之玻珠, 将基因转移进入目标细胞中之基因转移效率之图 。 图9系说明以纤维母细胞生长因子、以及含有纤维 母细胞生长因子之功能性物质,对目标细胞进行转 形之图。 图10系说明所用含有纤维母细胞生长因子之功能 性物质之量与基因转移效率间之关系之图。 图11系说明以含有纤维母细胞生长因子之功能性 物质,对目标细胞进行转形之图。 图12系另一说明以纤维母细胞生长因子、以及含 有纤维母细胞生长因子之功能性物质,对目标细胞 进行转形之图。 图13系说明所用含有胶原蛋白片段之功能性物质 之量与基因转移效率间之关系之图。 图14系说明以聚离胺酸将基因转移进入目标细胞 中之基因转移效率之图。 图15系说明以纤连蛋白片段以及纤连蛋白片段之 聚合物,将基因转移进入目标细胞中之基因转移效 率之图。 图16系另一说明以纤连蛋白片段以及纤连蛋白片 段之聚合物,将基因转移进入目标细胞中之基因转 移效率之图。 图17系再一说明以纤连蛋白片段以及纤连蛋白片 段之聚合物,将基因转移进入目标细胞中之基因转 移效率之图。 图18系说明以含有纤维母细胞生长因子之功能性 物质、胶原蛋白片段、以及含有胶原蛋白片段之 功能性物质,将基因转移进入目标细胞中之基因转 移效率之图。 图19系说明以纤连蛋白片段将基因转移进入目标 细胞中之基因转移效率之图。 图20系说明以含有纤连蛋白片段之功能性物质以 及纤维母细胞生长因子,将基因转移进入目标细胞 中之基因转移效率之图。 图21系说明以含有纤维母细胞生长因子之功能性 物质以及纤连蛋白片段,将基因转移进入目标细胞 中之基因转移效率之图。 图22系说明以固定余玻珠上之纤连蛋白片段,将基 因转移进入目标细胞中之基因转移效率之图。 图23系说明所用纤连蛋白片段之量与目标细胞之 基因转导间之关系之图。 图24系说明以含有纤连蛋白片段之功能性物质以 及纤维母细胞生长因子,对目标细胞之基因转导之 图。 图25系另一说明以含有纤连蛋白片段之功能性物 质以及纤维母细胞生长因子,对目标细胞之基因转 导之图。 图26系说明以含有胶原蛋白片段之功能性物质,对 目标细胞之基因转导之图。 |
