一类双链RNA分子及其在制备抑制乙型肝炎病毒复制药物中的应用

摘要

本发明属于分子生物学与生物医药技术领域，具体为一种利用大肠杆菌发酵制备RNA干扰用双链RNA分子或小干扰RNA分子的方法，并将这些RNA分子用于制备治疗乙型肝炎的药物。将本发明得到的ldsRNA或siRNA以适当的比例与乙型肝炎病毒表达载体混合，并用尾静脉液压法注射到小鼠体内。结果显示非同源性序列ldsRNA和siRNA基本不抑制乙型肝炎病毒在小鼠体内的复制，而与乙肝病毒基因同源性的ldsRNA和siRNA可以有效抑制乙型肝炎病毒在小鼠体内的感染复制，抑制率高达90％以上。

主权项

1、一种利用大肠杆菌发酵制备用RNAi用ldsRNA和siRNA分子的方法，其特征在于包括构建ldsRNA表达载体，并转化大肠杆菌宿主菌，通过大规模发酵，用碱-SDS法抽提发酵菌体得到全RNA和质粒DNA的混合物；该混合物用CF-11柱进行纯化得到ldsRNA，并利用大肠杆菌RNase III将ldsRNA切成12-30bp的siRNA。