摘要 |
Cepa de levadura metilotróficas recombinantes productoras del homodímero BB de PDGF humano, construcciones de ADN y métodos para obtener dicha cepa. La invención se refiere a una cepa de Pichia pastoris recombinante productora del homodímero BB de PDGF, que comprende en su genoma por lo menos, una copia de una primera construcción de ADN y por lo menos una copia de una segunda construcción de ADN, donde dichas construcciones de ADN son capaces conjuntamente de dirigir la expresión y liberación al medio de dicho homodímero, donde dicha cepa produce más de 200 mg/L del dímero BB de PDGF. La cepa de la invención comprende: a) una primera secuencia de ADN insertable que corresponde a una secuencia 5' regulatoria (promotor) unida operablemente a b) una secuencia senal de exportación unida operablemente a c) una secuencia que codifica la porción madura de la cadena B de PDGF siendo dicha secuencia una secuencia de ADN de 327 pares de bases que comprende desde la base 1226 a la base 1552 de la secuencia codificante del PDGF, estando la secuencia unida operablemente a d) una secuencia 3' de finalización de la transcripción unida a e) un gen de selección unido a f) una segunda secuencia de inserción; y la segunda construcción de ADN comprende: a) una primera secuencia de ADN insertable que corresponde a una región 5' regulatoria (promotor) unida operablemente a b) una secuencia senal de exportación unida operablemente a c) una secuencia que codifica la porción madura de la cadena B del PDGF, siendo dicha secuencia una secuencia de ADN de 327 pares de bases que comprende desde la base 1226 a la base 1552 de la secuencia codificante del PDGF estando la secuencia unida operablemente a d) una secuencia 3' de finalización de la transcripción unida a e) un gen de selección de resistencia diferente del gen de selección de la primera construcción de ADN.
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