检测家蚕及其它昆虫微粒子病的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及一种昆虫微粒子病(Nosema属)的诊断方法及其诊断试剂盒。具体地，本发明通过碱、二价金属离子螯合剂与去垢剂组成的DNA提取液处理样品，再经过苯酚氯仿抽提得到样品中的DNA；并根据微粒子(Nosema属)基因组中一段高度保守的DNA序列设计的引物来扩增微粒子基因组片段；通过电泳即可检测出昆虫是否受到微粒子(Nosema属)感染。本发明的方法和相关的试剂盒具有成本低、使用简便、特异性强、广谱性高等优点，并能检测出发病早期的感染昆虫。

主权项

1.一种检测家蚕及其它昆虫微粒子病的方法，它包括步骤：(a)制备待测昆虫样品PCR反应模板：昆虫样品放入DNA提取液中，捣碎混匀，加入DNA抽提液，离心，取上清液DNA模板；DNA提取液包括1-100mM的二价金属离子螯合剂和0.1％-5％(W/V)的去垢剂，并且用碱性物质将提取液的pH值调至11-14；(b)用检测16S小亚基rRNA基因的特异性引物和步骤(a)中模板，在特异性扩增条件下进行PCR扩增；(c)对步骤(b)的扩增产物进行电泳检测，根据电泳结果判断16S小亚基rRNA基因的存在与否。