核酸扩增方法

摘要

在样品中，利用在3′末端或3′末端侧具有核糖核苷酸的嵌合寡核苷酸引物、内切核糖核酸酶及具有链置换活性的DNA聚合酶扩增靶核酸的高灵敏度和高特异性方法，也即等温的和嵌合引物起始的核酸扩增(ICAN)方法；通过上述方法获得的扩增片段的检测方法；利用上述扩增方法制备靶核酸的方法；以及用于这些方法中的嵌合寡核苷酸引物。

主权项

1.核酸扩增方法，该方法包括；(c)将作为模板的核酸、脱氧核糖核苷三磷酸、具有链置换活性的DNA聚合酶、至少一种引物和RNA酶H混合来制备反应混合物，其中，此引物是基本上与作为模板的核酸的核苷酸序列互补的嵌合寡核苷酸引物，并且此引物含有核糖核苷酸及选自脱氧核糖核苷酸和核苷酸类似物、定位于引物3′末端或3′末端侧的核糖核苷酸中的至少一个；及(d)对反应混合物孵育足够时间以产生反应产物。