反转录病毒体内转染精原干细胞介导的转基因方法

摘要

本发明涉及一种转基因方法，尤其是涉及以重组反转录病毒为介导体内转染精原干细胞的转基因方法。将目的基因克隆到反转录病毒载体，转化PA317细胞，收集并浓缩由阳性细胞克隆产生的重组病毒，将重组病毒注射到幼龄小鼠的曲细精管内，由该公鼠繁殖子代，在公鼠精液和其子代鼠中均证明有目的基因的整合，整合率可达12.5％，并可遗传给后代。本发明建立了一种以重组反转录病毒体内转染精原干细胞为介导的转基因新技术，其特点是操作简单，投入费用低廉，具有重复性和可靠性。

主权项

1、一种反转录病毒体内转染精原干细胞介导的转基因方法，包括以重组反转录病毒为介导体内转染精原干细胞，目的基因首先重组到反转录病毒载体中，重组病毒经在PA317细胞上感染增殖后，收集重组病毒并进行浓缩，浓缩病毒注射到幼龄公鼠的曲细精管内，小鼠发育至性成熟后，利用其繁殖子代。