发明名称 编码生物功能性胆盐刺激性脂肪 /羧酸酯脂肪 之新颖DNA分子
摘要 本发明系有关一种DNA分子,其含有插入序列并可编码依作用部位不同而称为胆盐刺激性脂肪(Bile Salt-Stimulated Lipase, BSSL)或羧酸酯脂肪( Carboxyl Ester Lipase,CEL)之人类蛋白质。该DNA分子可有效地用于制备重组人类BSSL/CEL,较佳者系在转基因型非人类哺乳动物中产制。该重组人类BSSl/CDL可做为取代母乳哺育婴儿之婴儿奶粉之成份使用,或可用于制备对抗诸如脂肪吸收不良,纤维性囊肿及慢性胰脏炎等之药剂。
申请公布号 TW329435 申请公布日期 1998.04.11
申请号 TW082104186 申请日期 1993.05.26
申请人 阿斯特拉股份有限公司 发明人 卡特.沙文.马格斯.因贝克;卡尔.古纳.柏杰雪尔;史汀.伦纳特.汉森;沃夫.腓迪克.邦特斯;彼德.尼斯.艾瓦.卡森;珍.比克.腓迪克.托纳;珍纳特.安尼卡.尼森
分类号 C12N9/20;C12N15/12;C12N15/63 主分类号 C12N9/20
代理机构 代理人 陈长文 台北巿敦化北路二○一号七楼
主权项 1.一种DNA分子,其可编码生物功能性胆盐刺激性脂 肪 /羧酯酯脂肪(Bile Salt-Stimulated Lipase/ Carboxyl Ester Lipase, BSSL/CEL),具下示之核酸序 列:及其简并序列。2.一种DNA分子,其编码生物功能 性胆盐刺激性脂肪/ 羧酯酯脂肪(BSS/CEL),含有下列序列及其简并序列 。3.一种制备可复制表现载体pS452之方法,该载体 载有根 据如申请专利范围第1或2项之编码人类BSSL/CEL之DNA 分子并可调介其表现,此方法包括将根据申请专利 范围第 1或2项之DNA分子插入可于鼠胚胎细胞中复制之载 体中 。4.根据申请专利范围第3项之方法,其中所制得之 载体 pS452可编译生物功能性BSSL/CEL,并含有可使其在非 人 类哺乳动物乳腺中表现之调节序列。5.一种制备 衍生自多细胞有机体并载有根据申请专利范围 第3或4项之方法所制备载体之细胞之方法,其包括 将根 据申请专利范围第3或4项之方法所制得之载体导 入鼠胚 胎细胞中。6.一种制备含有一融合基因之哺乳类 表现系统之方法,该 融合基因可于含有该融合基因之成熟雌性鼠之乳 腺中表现 因而致使人类BSSL/CEL可于该融合基因表现时产生, 此方 法之特征在于将根据申请专利范围第1或2项之DNA 分子 与鼠WAP启动子连接,以制造融合基因随后使该融合 基因 在成熟雌鼠之乳腺中表现。7.一种制备融合基因 之方法,其包括将根据申请专利范围 第1或2项之DNA分子插入一可调节鼠乳蛋白基因之 基因 中。8.一种制备载有根据申请专利范围第6项之方 法所制得之 表现系统之鼠胚胎细胞之方法,其包括将根据申请 专利范 围第6项之方法所制得之系统导入鼠胚胎细胞中。 图示简 单说明:第一图CEL基因之位置。第二图由人类泌乳 乳腺 、胰脏及脂肪组织所得之引子延伸分析。第三图 人类CEL 及老鼠CEL基因5'-侧翼区域之点渍分析。第四图人 类CEL 基因5'-侧翼序列之分析。第五图制备质体pS452之 方法。 第六图质体pS312之图示构造。第七图质体pS452之图 示构 造。第八图将人类BSSL/CEL基因体结构导入WAP基因 之第 一表现序列之图示,如实例二所述者。第九A图用 以监定 导入外来基因之动物之PCR-引子之定位图。第九B 图所使 用PCR引子之序列。第九C图洋菜胶电泳,显示可做 为基础 动物之典型PCR分析。第十图由具有pS452重组老鼠 WAP/人 类CEL基因之小老鼠品系所得乳汁之免疫吸渍分析 。
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