表面增强拉曼散射标记免疫检测法

摘要

本发明为表面增强拉曼散射标记免疫检测法属免疫检测领域。以硅或二氧化硅作检测基片1，以表面增强拉曼散射活性分子6作为标记物，经形成组装体11—制备SERS免疫金探针—免疫复合反应—银染色14的过程，形成识别抗体/抗原/表达抗体的三层夹心结构样品，最后对样品进行拉曼光谱检测。其中抗原是待检测物4，识别抗体3和表达抗体7与抗原是配对抗体抗原。通过对标记的免疫金粒子5进行银染色，实现对标记物的拉曼信号增强放大。本发明可用于一些特殊疾病、传染病和癌症的检测，也可用于毒品检测和环保监测。本发明在对同时检测多种待检测物方面具有巨大的应用潜力，为解决一种疾病多致病因素的诊断问题提供可能。

主权项

1、一种表面增强拉曼散射标记免疫检测法，包括银染色(14)的过程，其特征在于，以硅或二氧化硅作检测基片(1)，经形成组装体(11)——制备SERS免疫金探针——免疫复合反应——银染色(14)——拉曼光谱检测过程完成的；所说的形成组装体(11)是利用醛基化合物将单克隆识别抗体(3)固定在修饰有氨基硅烷(2)的硅片或二氧化硅检测基片(1)的表面，并用赖氨酸封闭表面未反应完全的醛基；所说的制备表面增强拉曼散射免疫金探针是，以表面增强拉曼散射活性分子(6)作为标记物，将表面增强拉曼散射活性分子(6)与单克隆表达抗体(7)共同吸附在金纳米粒子(5)表面，形成表面增强拉曼散射免疫金探针，用牛血清白蛋白(8)封闭金纳米粒子(5)表面空位；所说的免疫复合反应是，将待检测物(4)的溶液滴在组装体上，构成检测载体，再将表面增强拉曼散射免疫金探针滴加在检测载体上进行免疫应答形成三层夹心结构的样品；所说的银染色(14)是将三层夹心结构的样品浸泡在对苯二酚和硝酸银混合水溶液中；最后通过拉曼光谱仪对银染色的三层夹心结构的样品进行检测。