生产RNA病毒和基于RNA病毒的载体颗粒的组合物及方法

摘要

本发明提供使用无复制能力的辅助痘病毒重组体在细胞培养物中以及体外生产RNA病毒序列、重组RNA病毒、RNA病毒突变体和RNA病毒衍生的载体的方法。这些方法允许不依赖于其天然复制途径并避开任何细胞屏障，在细胞培养物中以及体外产生RNA病毒序列和病毒颗粒。本发明还提供按本发明方法制得的新的RNA病毒序列和病毒颗粒。

主权项

1.生产包壳RNA病毒的方法，其包括以下步骤：(a)提供能够在真核细胞中形式衣壳并包装RNA病毒基因组的多肽编码序列；(b)提供包括可操作地连接到噬菌体启动子和噬菌体转录终止子序列上的病毒RNA病毒基因组序列的构建体，其中噬菌体启动子和噬菌体转录终止序列是可操作地匹配的；(c)提供与步骤(b)的噬菌体启动子可操作地匹配的噬菌体RNA聚合酶编码序列，其中所说的编码序列被可操作地连接到痘病毒启动子上；(d)在允许序列表达并组装包含RNA病毒基因组序列的衣壳的条件下，在真核细胞中共同表达步骤(a)的多肽、步骤(b)的RNA病毒基因组序列以及步骤(c)的噬菌体RNA聚合酶编码序列，从而制得包壳的RNA病毒。