低成瘾性镇痛药物高通量筛选平台

摘要

本发明的名称为低成瘾性镇痛药物高通量筛选平台，涉及生物学筛选模型。本发明一种低成瘾性镇痛药物的高通量筛选方法，基本上包括以下步骤：1)将规模培养的CHO－OPR8及CHO－P分别装入层析柱中，得到CHO－OPR8层析柱及CHO－P层析柱；2)将待选择的肽库上样到CHO－OPR8层析柱，洗涤层析柱，将收集的洗脱液上样到CHO－P层析柱，收集穿过峰，得到第一轮筛选出的候选多肽；3)第二轮洗涤4)第三轮洗涤5)将最后一轮筛选的噬菌体全部转染K91Kan，挑选阳性菌株进行接种培养，提取质粒，进行序列分析；6)将复制型噬菌体质粒的序列分析结果与空载体进行比较，寻找插入片段的核苷酸序列，推导出氨基酸序列，得到目的多肽。

主权项

1、一种低成瘾性镇痛药物的高通量筛选方法，基本上包括以下步骤：1)将规模培养的CHO衍生工程细胞株CHO-OPR8 CGMCC №0613及CHO衍生工程细胞株CHO-P CGMCC №0612分别装入层析柱中，得到CHO-OPR8层析柱及CHO-P层析柱；2)将待选择的肽库上样到CHO-OPR8层析柱，洗涤层析柱后采用洗脱液洗脱与CHO-OPR8特异结合的样品，将收集的洗脱液上样到CHO-P层析柱，收集穿过峰，得到第一轮筛选出的候选多肽；3)将第一轮筛选出的候选多肽再上样到CHO-OPR8层析柱，将收集的洗脱液上样到CHO-P层析柱，收集穿过峰，得到第二轮筛选出的候选多肽；4)将第二轮筛选出的候选多肽再上样到CHO-OPR8层析柱，将收集的洗脱液上样到CHO-P层析柱，收集穿过峰，得到第三轮筛选出的候选多肽；5)将最后一轮筛选的噬菌体全部转染K91Kan，挑选阳性菌株进行接种培养，提取质粒，进行序列分析；6)将复制型噬菌体质粒的序列分析结果与空载体进行比较，寻找插入片段的核苷酸序列，推导出氨基酸序列，得到目的多肽。