鉴定雌激素受体－β/α选择性调节剂的生物试验

摘要

本发明提供了一种新的试验方法,用于鉴定选择性激活雌激素受体(ER)α或的β亚型的化合物。具体地说,即对分别测定ER－β活性和ER－α活性的两个试验的结果进行解释。测定ER－β活性的试验所用的细胞含有内源性金属硫蛋白－II和含人ER－β编码聚核苷酸的DNA质粒。该试验监测所述细胞内金属硫蛋白－II－mRNA的表达,金属硫蛋白－II的表达水平受潜在配体与ER－β结合的调节。测定ER－α活性的试验所用的细胞含有ER－α和含有一种报道基因的DNA质粒,其中该报道基因与一个雌激素应答性元件相连。该试验监测该报道基因的表达,该报道基因的表达水平受潜在配体与ER－α结合的调节。将在一个试验中有调节活性而在另一试验中几乎没有活性的化合物确定具有对雌激素受体该亚型的选择性。

主权项

1.一种在受体结合试验中筛选ER结合性化合物的方法，该方法检测ER-β多肽介导的转录，该方法包括以下步骤：(a)提供一种细胞，其含有至少一段受雌激素调节的编码MT-II的DNA序列和至少一段编码ER-β多肽的DNA序列，该受体具有转录活性；(b)使所述细胞与可结合ER的待测化合物或对照接触；和(c)检测MT-II的表达，所述MT-II表达增强，高于对照，表示待测化合物具有雌激素激动剂活性。