摘要 |
"PROCESSOS PARA CONSTRUIR UM BACULOVìRUS RECOMBINANTE, PARA PRODUZIR UM VETOR DE TRANSFERêNCIA E PARA PURIFICAR PROTEìNAS, BACULOVìRUS RECOMBINANTE, VETOR DE TRANSFERêNCIA, COMPOSIçãO INSETICIDA E USO DE UM POLIEDRO RECOMBINANTE". Um baculovírus recombinante, que produz um poliedro recombinante constituido de uma poliedrina de baculovírus (PH), uma proteína de cristal de Bacillus thuringiensis (CP) e proteina fluorescente verde de água-viva Aequorea victoria (GFP), é construido introduzindo-se um vetor de transferência portando um gene de fusão codificando uma proteina de fusão em que a PH, a CP e a CFP estão diretamente ligadas desde a terminação N até à terminação C, em seq³ência, e um baculovírus de tipo selvagem numa célula de inseto, simultaneamente, e cultivando-se a célula. Este vetor de transferência de baculovírus pColorBtrus é construído sintetizando-se o fragmento de DNA codificando GFP a partir de plasmídeo pGFP, o gene de PH de nucleopoliedrovírus de Autographa californica, e um gene de CrylAc de plasmídeo pPN6.6 portando um gene de CrylAc de Bacillus thuringiensis por meio de reações em cadeia de polimerase, e inserindo-se primeiramente o fragmento de DNA codificando GFP e o gene de PH no vetor de expressão de baculovírus pAcUW31 de uma tal forma que a ponta 5<39> do fragmento de DNA codificando GFP esteja ligada à ponta 3<39> do gene de PH e, depois, o gene de CrylAc entre o gene de PH e o fragmento de DNA codificando GFP. O vírus recombinante pode matar pragas de insetos com alta patogenicidade dentro de pouco tempo, e é equipado com um dispositivo de monitoração para insetos infectados, de modo a impedir-se o seu uso excessivo.
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