| 发明名称 | 人结缔组织生长因子及其制备方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种人结缔组织生长因子(HCTGF)及其制备方法,包括以下步骤:从初产妇的胎盘脐静脉得到可维持培养的人脐静脉内皮细胞;再从经PDGF刺激的人脐静脉内皮细胞中提取的mRNA经过逆转录PCR扩增得到CTGFcDNA片段;经基因修饰、连接并扩增得到CTGF编码区基因片段;然后对所得的各CTGF亚克隆片段进行修饰、连接制得。 | ||
| 申请公布号 | CN1314415A | 申请公布日期 | 2001.09.26 |
| 申请号 | CN01107226.1 | 申请日期 | 2001.02.27 |
| 申请人 | 中国医学科学院医学生物学研究所 | 发明人 | 李琦涵;赵红玲;王炯;王丽春;赵树栋;孙明;和绍清;董承红;胡方;刘龙丁;董少忠;王晶晶;马绍辉 |
| 分类号 | C07K14/475;C12N15/12;C12N15/63;C12Q1/00 | 主分类号 | C07K14/475 |
| 代理机构 | 云南协立专利事务所 | 代理人 | 旃习涵;吴平 |
| 主权项 | 1、一种人结缔组织生长因子，其序列特征为：①hCTGF的cDNA位序列含有一个1050个核苷酸的开放阅读框，起始位点位于第120位，TGA终止位点位于第1179位，编码350个氨基酸；对数个基因片段中的有关位置进行无义点突变修饰后，使该基因增加了一个KpnⅠ位点，一个xhoⅠ位点；包括5’和3’非翻译区的多核苷酸；含启动子的5’调控区；CTGF开放阅读框编码的多肽含39个半胱氨酸残基；该肽的氨基端含一段疏水信号序列，在氨基酸系列的28位和225位天冬酰胺基上有两个N-连接的糖基化位点。CTGF多肽的特征是以单体形式存在，分子量为36～38KD；②来源：克隆：中国人原代脐静脉内皮细胞mRNA；③序列描述：120 Encoding region<img file="A0110722600021.GIF" wi="351" he="23" />5｀...../ATGACCGCCGCCAGTATGGGCCCCGTCCGCGTCGCCTTCGTGGTCCTCCTCGCCCTCTGCAGCCGGCGGGCCGTCGGCCACAACTGCAGCGGGCCGTGCCGGTGCCCGGACGAGCCGGCGCCGCGCTGCCCGGCGGGCGTGAGCCTCGTGCTGGACGGCTGCGGCTGCTGCCGCGTCTGCGCCAAGCAGCTGGGCGAGCTGTGCACCGAGCGCGACCCCTGCGACCCGCACAAGGGCCTCTGTGACTTCGGCTCCCCGGCCAACCGCAAGATCGGCGTGTGCACCGCCAAAGATGGTGCTCCCTGCATCTTCGGTGGTACGGTGTACCGCAGCGGAGACTGGTTCCAGAGCAGCTGCAAGTACCAGTGCTCGTGCCTGGACGGGGCGGTGGGCTGCATGCCCCTGTGCAGCATGGACGTTCGTCTGCCCAGCCCTGACTGCCCCTTCCCGAGGAGGGTCAACCTGCCCGGGAAATGCTGCGAGGAGTGGGTGTGTGACGAGCCCAAGGACCAAACCGTGGTTGGGCCTGCCCTCGCGGCTTACCGACTGGAAGACACGTTTGGCCCAGACCCAACTATGATTAGAGCCAACTGCCTGGTCCAGACCACAGAGAAGCAGAGCCGCCTGTGCATGGTCAGGCCTTGCGAAGCTGACCTGGAAGAGAACATTAAGAAGGGCAAAAAGTGCATCCGTACTCCCAAAATCTCCAAGCCTATCAATTTGAGCTTTCTGGCTGCACCAGCATGAAGACATACCGAGCTAAATTCTGTGGAGTATGTACCGACGGCCGATGCTGCACCCCCCACAGAACCACCACCCTGCCGGTGGAGTTCAAGTGCCCTGACGGCGAGGTCAAGAAGAAGAACATGATGTTCATCAAGACCTGTGCCTGCCATTACAACTGTCCCGGAGACAATGACATCTTTGAATCGCTGTACTACAGGAAGATGTACGGAGACAT1179 Noncoding region<img file="A0110722600031.GIF" wi="765" he="33" />GGCATGA/AGCCAGAGAGTGAGAGACATTAACTCATTAGACTGGAACTTGAACTGATTCACATCTCATTTTTCCGTAAAAATGATTTCAGTGGCACAAGTTATTTAAATCTTTTTTTCTAACTGGGGGAAAAGGTCCCACCCAATTCAAACATTGTGCCATGTCAAACAAATAGTCTATCTTCCCAGCACTGGTTTGAAGAATGTAATACTTGACAGTGGAACTACATTAGTACACAGCACCAGAATGTATATTAAGGTGTGGCTTTAGGAGCACTGGGAGGGTACCGGCCCGGTTAGTATCGTCAGATCGACTCTTATAAGAGTAATATGCCTGCTATTTGAAGTGTAATGGAGAAGGAAAATTTTAGCGTGCTCACTGACCTGCCTGTAGCCCCAGTGACAGCTAGGATGTGCATTCTCCAGCCATCAAGAGACTGAGTCAAGTTGTTCCTTAAGTCAGAACAGCAGACTCAGCTCTGACATTCTGATTCGAATGACACTGTTGTATGCAGCTATTCTAGTAGAATGTGTAGCCCCACTTAATGAAAAAATCCTTATAAAAACTGAAAAACTCTATATAGGTGATCAGNNNTTTCACCNGGAAGCATTTGGTTCTACTTTATATGACTNNNTCGGACAGTTTATTGTTGAGAGTGTGAAAAAAAGTTACATGTTTGCACCTTCTAGTTAAAATAAAGTTCATGTTCGCCCTTTCTAGTTGAAGAAAGTGTATATTTTTTCTAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA3’ | ||
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